Bst DNA聚合酶, 大片段
货号 | 规格 | 浓度 |
RP2001S | 800 units | 8,000 units/ml |
RP2001L | 8,000 units | 8,000 units/ml |
产品说明:Bst DNA聚合酶大片段是Bacillus stearothermophilus DNA聚合酶的一部分,具有5→3DNA聚合酶活性,但不具有5→3外切核酸酶活性。
来源:来源于E.coli菌株,此菌株含有来自Bacillus stearothermophilus DNA聚合酶的基因,该基因不具有5→3外切核酸酶活性。应用基因重组技术将该基因在E.coli菌株中表达,并运用一定的层析等技术纯化。
应用:
1)富含GC序列的DNA 序列测定
2)微量(纳克量)DNA模板的快速测序等
10 X反应缓冲液组成:
200 mM Tris-HCl,100 mM (NH4)2SO4,100 mM KCl,20 mM MgSO4,1 % Triton X-100,pH 8.8 @ 25°C
反应条件:
1 X反应缓冲液,65℃温浴。
单位定义:65°C条件下,30分钟内使10 nmol 的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。
活性检测条件:50 mM KCl, 20 mM Tris-HCl (pH 8.8), 10 mM MgCl2, 30 nM M13mp18 SS DNA, 70 nM M13 测序引物(-47) 24 mer, 200 µM dATP, 200 µM dCTP, 200 µM dGTP, 100 µM 3H dTTP, 100 µg/ml BSA和酶,65°C温育。
贮存条件:50 mM KCl, 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.1% Triton X-100 和50% 甘油。贮存于-20°C。
热失活:80°C ,20 分钟
注意事项:
Bst DNA聚合酶不具有3’-5’外切酶活性
长期贮存需加入100 µg/ml BSA或0.1%Triton X-100.
建议反应温度不要超过70℃。
Bst DNA聚合酶不能用于热循环测序或PCR