Taq DNA聚合酶

 

货号	规格（U）	价格
P1011	500	150
P1012*	500	190
P1013	1,000	270
P1014*	1,000	350
P1015	12,000	2900

注：1 P1011~P1014产品包装中均提供6×上样缓冲液。

       2 *标识制品中附带dNTPs混合物。

 

产品组分

P1011

Taq DNA聚合酶  (5 U/μl   )           100 μl

10×Taq Buffer  （Mg²⁺ Plus）   1.25ml

10×Tpol Buffer （Mg²⁺ Plus）    1.25 ml

6×Loading Buffer                         1 ml   

 

P1012

Taq DNA聚合酶  (5 U/μl     )         100 μl

10×Taq Buffer  （Mg²⁺ Plus）   1.25ml

10×Tpol Buffer （Mg²⁺ Plus）    1.25 ml

dNTPs（各2.5 mM）                       ml

6×Loading Buffer                           1 ml 

 

 P1013

Taq DNA聚合酶 ( 5 U/μl    )            200 μl

10×Taq Buffer  （Mg²⁺ Plus）   1.25ml×2

10×Tpol Buffer （Mg²⁺ Plus）    1.25 ml×2

6×Loading Buffer                           1 ml×2

 

P1014

Taq DNA聚合酶  (5 U/μl )               200 μl

10×Taq Buffer  （Mg²⁺ Plus）   1.25ml×2

10×Tpol Buffer （Mg²⁺ Plus）    1.25 ml×2

dNTPs（各2.5 mM）                      1 m×2l

6×Loading Buffer                            1 ml  

 

P1015

Taq DNA聚合酶  5 U/μl           100 μl×24

10×Taq Buffer  （Mg²⁺ Plus）   1.25ml×24

10×Tpol Buffer （Mg²⁺ Plus）    1.25 ml×24

 

• Taq DNA聚合酶分为2.5 U/μl与5 U/μl两种包装，可自由选择，如没特别说明提供5 U/μl的包装。

•  10×Taq Buffer和10×Tpol Buffer 分为Mg²⁺ Plus与Mg²⁺ Free两种包装，可方便选择。如没特别说明提供10×PCR Buffer（Mg²⁺ Plus）和10×Tpol Buffer（Mg²⁺ Plus）。Mg²⁺ Free的 10×Taq Buffer提供25 mM MgCl_2,Mg²⁺ Free的 10×Tpol Buffer提供25mM MgSO₄。
• P1015不包含6×Loading Buffer,如有需要请单独购买。

 

保存条件

-20℃保存。

 

产品说明

  Taq DNA聚合酶是嗜热性细菌Thermus aquaticus来源的热稳定重组型Taq DNA聚合酶，分子量为94 KD。扩增片段的长度可达5 kb（简单模板）。延伸速度为0.9~1.2 kb/ min（70~75℃）。该酶具有5’→3’聚合酶活性，无3’→5’外切酶活性。扩增产物具有3-dA。

 

产品特点

• 热稳定性好：95℃下半衰期超过40 min。
• PCR产物具有3’-dA，可直接用于T/A克隆。

 

产品用途

• 常规PCR扩增
• DNA标记
• DNA测序
• 制备TA克隆用PCR产物

 

活性定义

    一个活性单位（U）指用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在72℃、30 min内，摄入10 nmol全核苷酸所需的酶量。

 

质量控制

    相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染；PCR方法检测无宿主残余DNA，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因；室温放置一周，扩增活性无明显改变。

 

 

应用举例

注：以下反应举例为50 μl标准PCR体系，仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物结构、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。

 

以λDNA为模板，扩增1kb片段。

λ DNA（2.5 ng/μl）　　　　　　　　      1 μl　　　　　  

引物1 （10 μM） 　　　　　　　   　     2 μl

引物2 （10 μM）　　　　　　　　 　    2 μl

10×PCR  Buffer 　　　　　　                  5 μl

dNTPs（2.5 mM）           　   　              4 μl

Taq DNA聚合酶（5 U/μl）   　     0.25-0.5 μl

超纯水       　　　　　　　         补足至50 μl

 

PCR反应条件

94℃           3 min

94℃           30 sec

55~68℃     30 sec ｝   30 Cycles

72℃          1-2 min

72℃          10 min

 

 

Q&A

 

问：如何利用Taq DNA聚合酶进行加A反应？

答：由高保真DNA 聚合酶（如Pfu）产生的PCR 扩增片段的纯化产物1-7μl；

    加入1μl 的10×PCR Buffer（含MgCl₂）；

    加入dATP 至终浓度0.2 mM；

    加入5 U的Taq DNA 聚合酶；

    加超纯水至终反应体积为10μl；

    70℃孵育15-30 分钟；

    进行TA克隆。