Taq DNA 聚合酶

产品简介： 本制品是94KD的耐热的DNA聚合酶。是把Thermusaquaticus 

          DNA Polymerase的基因经过克隆转化到大肠杆菌中进行表达后，

         分离提取而得到的。它与天然Taq DNA聚合酶具有相同的功能。

          该酶反应需Mg2+

参与，它以双链DNA为模板催化核苷酸从5’向

          3’末端形成双链DNA。该酶同时具有5’→3’核酸外切酶活

         性。该产品主要用于DNA的PCR扩增，DNA测序，可以很好地扩

         增1kb地DN**段。该产品主要包括酶、10×反应缓冲液与氯化

         镁溶液。

单位定义：在74℃，30分钟内，能够吸收10mmol dNTP，形

       成酸性不溶性物质所需的酶量为一个活性单位。

酶储存缓冲液B:

       50％甘油，20mM Tris-HCl(pH8.0),100mM KCl，1mM 

        DTT，0.1mM EDTA，0.5％Tween20和0.5％Nonidet P40。

配套试剂：

       1．10×反应缓冲液(不含MgCl

2): Taq DNA Polymerase 

            10 X Reaction buffer (without Mg2+

)包含 500mM KCl, 

            100mM Tris-HCl (pH9.0, 25℃), 1% Triton X-100. 

            建议该缓冲液加入每种dNTP的最适浓度为0.2毫摩尔。

      2．25mM MgCl

2：反应中镁离子在混合物中的最终浓度由

           使用者根据自己需要决定。建议使用浓度在1－4毫摩尔。

           注：使用前完全溶解氯化镁溶液并充分振荡几秒钟。

      3．10X反应缓冲液(含MgCl

2)：包含 15mM MgCl

2，

             500mM KCl, 100mM Tris-HCl (pH9.0, 25℃), 1% Triton 

             X-100. 建议该缓冲液加入每种dNTP的最适浓度为0.2毫

            摩尔。

注意：反复冻融可能会引起氯化镁沉淀，将缓冲液在90℃加热

          10分钟能恢复溶液的均一性。

质量控制：

     1. 活性:大于5单位/微升。

     2. Overdigest (OD) 检测: 30单位Taq DNA 聚合酶与1微克

         λDNA在74℃下反应16小时后，用琼脂糖凝胶电泳未检

         出降解的λDNA。

     3. 切口酶检测: 30单位Taq DNA 聚合酶与1微克超螺旋质

         粒DNA在74℃下反应4小时后，用琼脂糖凝胶电泳未检

         出切口酶或线性DNA带。

     4. 热稳定性检测: 94℃时，每微升5单位Taq DNA 聚合酶在

         缓冲液中的半衰期长于1小时。

储存条件：−20℃                         

From Promega M1665S