RTGreen nucleic acid gel stain, 20× concentrate in water产品描述

RTGreenTM是一种与SYBR Green I具有相似光谱特性的DNA结合染料，独特的工作特性使其不仅可用于荧光定量PCR（qPCR），而且可用于高分辨率溶解曲线（HRM）分析。相比较于SYBR Green I，优势主要表现在以下三个方面： 
1) RTGreenTM对PCR 抑制性远小于SYBR Green I 
智能化的“按要求释放”DNA 结合技术赋予RTGreenTM对PCR的低抑制性。正因如此，PCR实验中可使用高浓度的RTGreenTM从而获得大大增强的扩增信号。高浓度的RTGreenTM消除了“染料重分布”的缺陷，使其既可用于多重PCR，也可用于HRM分析。 
2) RTGreenTM的稳定性极强 
在正常的储存、操作和PCR过程中不会被破坏。在缓冲溶液中的染料可以安全的储存在室温或冰箱里，也可以反复冻融。然而SYBR Green I很不稳定而且降解后对PCR 抑制性更强。 
3) RTGreenTM降低细胞膜通透性，操作更加安全 
细胞膜穿透性测试表明，RTGreen 几乎不能穿透细胞膜，安全性高。RTGreen 既没有诱变性也没有细胞毒性。相反，虽然 SYBR Green I 本身诱变性很弱，但它在细胞中可能抑制了正常DNA 的修复机制，使其有诱变增强作用。 
另外，RTGreenTM具有优越的兼容性，能够和各知名品牌的qPCR仪器兼容。用RTGreenTM替代SYBR Green I，无需改变任何您目前使用的操作步骤和仪器设备，非常方便。

 

RTGreen nucleic acid gel stain, 20× concentrate in water操作步骤（亦可使用实验室常用的SYBR Green I qPCR操作流程）

1.      配制qPCR反应体系（50 μl），如下：

10×polymerase buffer without magnesium	5 μL
50mM MgCl2a	2.5μL
2 mM dNTP	5 μL
20× RTGreenTM	2.5 μL
Taq DNA polymeraseb	1-5 U
each of primers (final concentrations)	0.1-1 μM
ddH2O	Up to 50 μL

a.      表示使用RTGreen^TM染料进行qPCR反应的Mg²⁺最佳推荐浓度是2.5 mM；

b.      表示使用Hotstart Taq DNA polymerase可以得到更理想的扩增效果，但需要根据经验调整工作体系。

2.  热循环荧光检测仪内进行PCR扩增，并在退火或延伸步骤实时记录荧光信号。

RTGreen nucleic acid gel stain, 20× concentrate in water运输与保存方法
冰袋（wet ice）运输。4 ºC干燥避光保存。保质期12个月。