腐草霉素
英文名称: Phleomycin (20mg/ml in solution)
型号:null    产品货号: 60217ES20
价格:请致电:010-57128832,18610462672
品牌: yeasen
试剂级别: 生化级

 Phleomycin (20mg/ml in solution) 腐草霉素

产品信息

产品名称

产品编号

规格

储存

价格(元)

Phleomycin (20mg/ml in solution) 腐草霉素

60217ES20

20mg

-20°C+4°C

868.00

Phleomycin (20mg/ml in solution) 腐草霉素

60217ES60

5×20mg

-20°C+4°C

3268.00

产品描述

Phleomycin,中文名腐草霉素,由Streptomyces verticillus(轮枝链霉菌)的突变株产生的一种糖肽抗生素,属于博来霉素(bleomycin)家族。抑菌机制在于腐草霉素可结合并插入DNA,从而破坏其双螺旋结构的完整性。腐草霉素对大多数细菌、真菌、酵母、植物细胞和哺乳动物细胞都有活性,尤其适用于对ZeocinTM敏感性低的细胞,如酵母菌和丝状真菌。

腐草霉素是分子遗传学研究中的选择性抗生素之一,可用于筛选携带Sh ble基因的转染细胞。Sh ble基因来源于Streptoalloteichus hindustanus,其可编码一种14kDa的蛋白,该蛋白可与腐草霉素强烈结合从而抑制其切割DNA链的活性。腐草霉素是由多种结构类似物构成的复合物,这些复合物仅仅在末端胺基有所差异。另外,因属于铜离子螯合的复合物,溶液呈蓝色。

本品以20mg/ml的无菌溶液形式提供,可直接用于细胞培养,在0.1-50μg/ml浓度范围内,腐草霉素可以抑制大多数好氧细胞的生长。

产品性质

CAS号(CAS NO.

11006-33-0

分子式(Formula

C55H85O21N20S2Cu•HCl

分子量(Molecular weight

1525

纯度(Purity

>90%(HLPC)

结构式(Structure

运输与保存方法

冰袋运输。

4°C-20°C保存。4°C稳定保存12个月,-20°C可稳定保存18个月。避免反复冻融。

操作方法

【注1细胞对腐草霉素的敏感性受pH值影响,如pH值越高,敏感性越高;另外,对于高渗透压培养基如原生质体再生用的培养基,腐草霉素的活性会明显降低2-3倍。因此也可能通过使用低盐培养基来降低腐草霉素使用量。

【注2使用前需将低温存放的腐草霉素置于室温回温,之后低速充分混匀。

1 大肠杆菌

携带bleomycin抗性基因如Sh bleTn5的质粒,一旦转化进入大肠杆菌受体菌如HB101 DH5a MC1061,赋予其腐草霉素抗性。


腐草霉素抗性的转化子可以在添加5 μg/ml Phleomycin的低盐LB琼脂培养基(Yeast extract 5g/L, Tryptone 10g/L, NaCl 5g/L, Agar 15 g/L, pH 7.5)中进行筛选。加有腐草霉素的平板可于4稳定保存1个月。

2 酵母菌

酿酒酵母的腐草霉素抗性转化子可在添加10 μg/ml PhleomycinYEPD培养基中进行筛选。

操作步骤:按常规方法进行酵母细胞转化,一旦DNA进入细胞后,用YEPD培养基稀释细胞并置于摇床上培养6h或过夜,使其抗性性状得以表达。之后将细胞冰浴1h并涂布培养在添加10 μg/ml PhleomycinYEPDpH 7.0)固体培养基上。

3 真菌

根据转化子对Phleomycin 的敏感性不同,在添加有10-50 μg/ml腐草霉素的再生培养基内进行筛选。先将细胞在4孵育过夜然后置于生长温度培养,可提高其对抗生素的敏感性。

4 植物细胞

根据植物类型不同,选择5-25 μg/ml Phleomycin进行转化子筛选。

5 哺乳动物细胞

5-50 μg/ml Phleomycin,推荐先通过建立灭杀曲线来确定最佳浓度。与G418做比较,可能需要更长的时间来杀死细胞或者使细胞从平板上脱落,尤其当细胞处于高密度的情况。

依细胞系不同,通常需要5~21天来挑选具腐草霉素抗性的稳定转染细胞。

注意事项

1)腐草霉素对浓酸较为敏感,但可短时间暴露于稀酸中。使用前将本品回温至室温,并轻轻混匀。

2)腐草霉素有毒,避免直接接触皮肤,不可吞服。酸性或碱性pH,或次***酸钠中会即刻失效。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品

产品编号

产品名称

规格

价格(元)

促销价(元)

60210ES25

Puromycin Dihydrochloride嘌呤霉素盐酸盐

25 mg

678.00

529.00

60210ES60

Puromycin Dihydrochloride嘌呤霉素盐酸盐

100 mg

2028.00

1609.00

60210ES72

Puromycin Dihydrochloride嘌呤霉素盐酸盐

250 mg

4478.00

3569.00

60210ES76

Puromycin Dihydrochloride嘌呤霉素盐酸盐

500 mg

8558.00

8539.00

60210ES80

Puromycin Dihydrochloride嘌呤霉素盐酸盐

1 g(1000mg)

15192.00

12139.00

60216ES62

Zeocin 盐酸博莱霉素

125mg

428.00

428.00

60216ES80

Zeocin 盐酸博莱霉素

1g

2548.00

2548.00

60218ES10

Blasticidin S 杀稻瘟菌素S 灭瘟素

10mg

598.00

598.00

60218ES50

Blasticidin S 杀稻瘟菌素S 灭瘟素

5×10mg

2310.00

2310.00

60218ES60

Blasticidin S 杀稻瘟菌素S 灭瘟素

10×10mg

4200.00

4200.00

60220ES03

G418 Sulfate (Geneticin) 遗传霉素

1g

358.00

358.00

60220ES08

G418 Sulfate (Geneticin) 遗传霉素

5g

1480.00

1480.00

60224ES03

Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B50 mg/ml

1g (20ml)

849.00

519.00

60225ES03

Hygromycin B 潮霉素B

1g

719.00

419.00

60225ES10

Hygromycin B 潮霉素B

10g

5599.00

3999.00