英文名称： Hieff NGSTM RNA Cleaner
Hieff NGSTM RNA Cleaner
随着转录组学的不断深入，RNA的类型，表达调控以及功能的复杂程度远远超乎我们的想象。去除含量占80%以上的核糖体RNA有助于将测序集中在含量少但信息大的RNA上。目前去除rRNA主要是通过探针和RNase H联合使用的方式，处理后的RNA会混杂很多消化产物，酶和离子，不利于后续RNA文库的构建。为此翊圣生物独立研发了RNA纯化试剂盒——Hieff NGSTM RNA Cleaner。该产品是基于SPRI（Solid Phase Reversible Immobilization）原理，不需要增加沉淀步骤，就可以高效去除蛋白、盐离子和其它杂质，获得高纯度浓缩的RNA样本。
除此之外，翊圣生物凭借其严格的生产工艺和质量控制，充分保证了产品的性能和批次间的稳定性。
| 产品应用： |
产品适用于纯化去除rRNA后的总RNA样本，体外转录的RNA产物，RNA标记产物以及合成的RNA等。纯化后的RNA适用于RNA文库构建、RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northern Blot和RNAi等实验。
| 产品特点： |
| 简便的操作 |
整个纯化过程无需离心、抽滤和沉淀，只需要简单的6步就可以获得高纯度的RNA样品。
图1 RNA纯化流程
①将稀释后的RNA样品与磁珠混合；
②通过磁力器进行分离，并吸除上清；
③80%乙醇漂洗一次；
④再次用80%乙醇漂洗一次；
⑤用无RNase的水进行洗脱；
⑥磁力器分离，并转移上清。
| 高效率回收 |
Hieff NGSTM RNA Cleaner 适用于不同来源的RNA样本，与同类产品相比具有更加出色的回收效率。Agilent 2100 Bioanalyzer分析结果显示，使用Hieff NGSTM RNA Cleaner获得的峰值均比同类公司高，而峰值的大小代表了相应分子量RNA的含量。
| 1）细胞样本总RNA纯化 图1.人HepG2-总RNA样品在使用纯化试剂盒纯化前后的RNA电泳结果。 L:Ladder；N：竞品公司；Y：Yeasen公司；检测仪器：Agilent 2100 Bioanalyzer
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| 2）拟南芥样本总RNA纯化 图2.拟南芥-总RNA样品在使用纯化试剂盒纯化前后的RNA电泳结果。 L:Ladder；N：竞品公司；Y：Yeasen公司；检测仪器：Agilent 2100 Bioanalyze
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| 3）水稻样本总RNA纯化
图3.水稻总RNA样品在使用纯化试剂盒纯化前后的RNA电泳结果。 L:Ladder；N：竞品公司；Y：Yeasen公司；检测仪器：Agilent 2100 Bioanalyzer |
| 更精准的检测 |
使用Hieff NGSTM RNA Cleaner，可以有效去除影响RT-PCR反应的抑制剂，让检测结果更加真实。如下表所示，使用相同质量的RNA样品，进行纯化前后Gapdh和β-actin的荧光定量分析，得到的Ct值纯化后比纯化前小。表明纯化后PCR可以得到更高效的扩增。
| RNA样品 | 人 | 小鼠 | 拟南芥 | |||
| 检测基因 | Gapdh | β-actin | Gapdh | β-actin | PP2A | TUB2 |
| 纯化前Ct值 | 12.92 | 12.36 | 18.74 | 18.53 | 24.33 | 22.2 |
| 纯化后Ct值 | 12.32 | 11.89 | 17.62 | 17.91 | 23.38 | 21.35 |
表1：使用总RNA纯化试剂盒纯化前后，RNA样品qRT-PCR Ct值变化
| 超高的性价比 |
| 品牌 | 货号 | 名称 | 规格 | 价格（元） |
| Beckman | A63987 | Agencourt RNA Clean XP- cDNA和cRNA体系纯化试剂盒 | 40 mL | 7500.00 |
| Yeasen | 12602E56 | Hieff NGSTM RNA Cleaner | 60 mL | 4266.00 |
常见问答:
1. RNA回收效率低或者没有。
1）RNA发生降解。操作过程要严格的确保无RNase的污染。
2）样本质量低。对于需要纯化的总RNA样本，建议Agilent 2100 Bioanalyzer分析后RIN值在7.0以上。
3）洗脱效率低。80%乙醇需现用现配，放置时间过久，可能由于乙醇挥发，造成浓度降低，影响洗脱效果；
4）洗脱溶液孵育时间过短。磁珠应于洗脱液中按规定时间孵育，常规为5 min；
5）磁珠过度干燥。切勿室温干燥磁珠大于10 min，过度干燥将降低洗脱效率。
2.纯化RNA中有磁珠残留。
1）磁珠分离时间过短或磁力器磁力较弱。增加分离时间或选用磁力强的磁力器，确保磁珠被磁力器全部吸附；
2）洗脱步骤中，吸取上清速度过快。缓慢吸取上清，注意切勿吸取磁珠。
3.如何检测回收后RNA的纯度？
可以通过测定A260/A280的比值来评估。
4.为什么分离后得到的RNA，OD 260/280比较低呢？
A260/A280的比值容易受到PH的影响，一般来说PH越低，A260/A280的比值就越低。建议使用10 mM Tris·Cl，PH 7.5进行溶解，再测定。
产品订购：
| 产品 | 货号 | 规格 | 价格（元） |
| Hieff NGSTM RNA Cleaner | 12602ES01 | 1 mL | 366.00 |
| Hieff NGSTM RNA Cleaner | 12602ES08 | 5 mL | 1066.00 |
| Hieff NGSTM RNA Cleaner | 12602ES56 | 60 mL | 4266.00 |
| Hieff NGSTM RNA Cleaner | 12602ES75 | 450 mL | 38566.00 |
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| 12603ES96 | 96 T | 2266.00 | |
| Hieff NGSTM mRNA Library Prep Kit for Illumina | 12301ES08 | 8 libraries | 2826.00 |
| 12301ES24 | 24 libraries | 9756.00 | |
| 12301ES96 | 96 libraries | 32856.00 | |
| Hieff NGSTM Library Quantification Kit for Illumina, qPCR Master Mix | 12302ES05 | 500 T | 1526.00 |
| Hieff NGSTM Library Quantification Kit for Illumina, DNA Standard (1-6) | 12307ES09 | 6×96 μL | 2126.00 |
| Hieff NGSTM End Repair Module | 12605ES20 | 20 T | 1466.00 |
| Hieff NGSTM dA-Tailing Module | 12606ES20 | 20 T | 1766.00 |
| Hieff NGSTM Fast-Pace DNA Ligation Module | 12607ES24 | 24 T | 3266.00 |
| 12607ES96 | 96 T | 10866.00 | |
| Hieff NGSTM Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module | 12608ES24 | 24 T | 2066.00 |
| 12608ES96 | 96 T | 6166.00 | |
| Hieff NGSTM Single-Indexed Adapter Kit for Illumina, Set 1 | 12611ES24 | 24 T | 1166.00 |
| 12611ES96 | 96 T | 4366.00 | |
| Hieff NGSTM Single-Indexed Adapter Kit for Illumina, Set 2 | 12612ES24 | 24 T | 1166.00 |
| 12612ES96 | 96 T | 4366.00 | |
| Hieff NGSTM Dual-Indexed Adapter Kit for Illumina | 12614ES96 | 96 T | 6566.00 |
| Hieff NGSTM Complete Adapter Kit for Illumina, Set 1 | 12615ES04 | 12×4 T | 1256.00 |
| 12615ES16 | 12×16 T | 4536.00 | |
| Hieff NGSTM Complete Adapter Kit for Illumina, Set 2 | 12616ES04 | 12×4 T | 1256.00 |
| 12616ES16 | 12×16 T | 4536.00 | |
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| 12601ES08 | 5 mL | 986.00 | |
| 12601ES56 | 60 mL | 6286.00 | |
| 12601ES75 | 450 mL | 26186.00 | |
| Hieff NGSTM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina | 12201ES08 | 8 libraries | 1726.00 |
| 12201ES24 | 24 libraries | 4626.00 | |
| 12201ES96 | 96 libraries | 16626.00 | |
| Hieff NGSTM Nano DNA Library Prep Kit for Illumina | 12202ES08 | 8 libraries | 2456.00 |
| 12202ES24 | 24 libraries | 6486.00 | |
| 12202ES96 | 96 libraries | 23567.00 | |
| Hieff NGSTM OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina | 12203ES08 | 8 libraries | 2456.00 |
| 12203ES24 | 24 libraries | 6486.00 | |
| 12203ES96 | 96 libraries | 23567.00 | |
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| 12204ES24 | 24 libraries | 6486.00 | |
| 12204ES96 | 96 libraries | 23567.00 | |
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HB170607