英文名称： ClonExpress Entry One Step Cloning Kit
隆如此简单！ClonExpress® Entry One Step Cloning Kit
● 简单、快速、高效
● 可高效克隆50 bp～10 kb片段，克隆效率可达100 cfu/ng Vector
● 含3- dA末端的PCR产物或平末端PCR产物均可直接克隆，无需额外的加dA步骤
● 反应体系内无连接酶，自连背景极低，阳性率可达95%以上
● 重组反应具有严格的方向性，克隆产物方向确定
l 广泛的体系兼容性
图1. ClonExpress. Entry One Step Cloning Kit兼容常规PCR体系
PCR产物可不经纯化直接进行克隆。使用Phanta、Phanta EVO、Phanta Max、Taq、Taq Plus、AceTaq、LAMP七种聚合酶扩增1 kb插入片段，扩增产物直接克隆至 CE Entry Vector，重组产物转化XL10化学感受态(#C503，Vazyme)。各种产物克隆效率如图所示。
l 宽广的模板量兼容范围
图2. ClonExpress. Entry One Step Cloning Kit能够高效克隆50 bp-10kb片段
扩增1 kb、2 kb、5 kb、7.5 kb、10 kb五个插入片段，纯化后克隆至 CE Entry Vector，重组产物转化XL10化学感受态(#C503，Vazyme)。
l 出众的克隆阳性率
图3. 因ClonExpress. Entry重组反应体系中无连接酶存在，所以几乎存在载体自连背景，克隆阳性率可超过95%。
分别克隆1 kb、2 kb、5 kb、7.5 kb、10 kb五个插入片段至 CE Entry Vector，重组产物转化后各平板分别挑取 50个克隆进行菌落PCR鉴定，不同长度插入片段克隆阳性率如图所示。
ClonExpress® Entry One Step Cloning Kit是在ClonExpress® 基础上研发而成的一种新型的入门克隆试剂盒。使用时需在目标DNA扩增引物5-端添加15 bp固定序列以实现扩增产物与试剂盒配套克隆载体CE Entry Vector末端的同源性。将目标DNA扩增产物和试剂盒配套载体混合后，仅需反应30min即可直接进行转化，完成克隆。反应过程中，同源重组酶Exnase® Entry会催化扩增产物和克隆载体的高效环化，效率可达100cfu/ng Vector，克隆阳性率可达95%以上。与TA克隆相比较而言，ClonExpress® Entry一步法入门克隆技术具有适用性更广、效率更高、克隆长度更长、流程更简单等诸多优势。