XL10化学感受态细胞

 产品信息

产品名称	产品编号	规格	储存
XL10 Chemically Competent Cell （XL10化学感受态细胞）	11803YB80	100μl×10管	-80℃

 

XL10化学感受态细胞产品描述

本品为使用大肠杆菌XL10菌株制备的化学转化超级感受态细胞，转化效率超过10⁸ cfu/μg，广泛适用于质粒转化、基因克隆、蓝白斑筛选等用途。

XL10感受态细胞的基因型：Δ(mcrA)183Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lacTet ^rHte [F′proAB lacI ^qZΔM15 Tn10(Tet ^r) Amy Cam^r]

XL10化学感受态细胞产品特性

1）XL10品系，具有四环素(Tet^r)和氯霉素(Cam^r)抗性，新型克隆菌株。

2）适合PCR产物、cDNA以及其他来源的非甲基化DNA的高效转化。

3）endA1，RecA1突变，确保外源DNA在宿主菌中的稳定性，有利于高质量质粒DNA提取。

4）Hte基因型，增强大片段DNA转化效率，并使宿主菌细胞生长速度大幅度提高。

5）可用于对重组质粒进行蓝白斑筛选。

6）转化效率≥10⁸ cfu/μg pUC19 DNA。

7）无外源质粒DNA残留。

XL10化学感受态细胞产品组分

编号	组分	规格
11803-A	XL10化学感受态细胞	100 μl × 10
11803-B	pUC19（0.1 ng/μl）	5 μl × 1

运输与保存方法

干冰运输。

XL10感受态细胞-80℃保存，pUC19质粒-20℃保存。有效期半年。

XL10化学感受态细胞注意事项

1）请勿将本品置于-20℃或液氮中保存

2）感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用。

3）待转化DNA加入体积不要超过感受态细胞体积的1/10。

4）待转化DNA加入感受态细胞后，请勿用移液枪吹打，轻轻弹匀即可。

5）为确保最高效率转化，整个操作过程应尽量轻柔。

6）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

使用说明

1）将感受态细胞从-80℃中取出，置于冰水浴中融化。

2）将待转化DNA加入到100 μl感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育30分钟。

3）将离心管置于42℃水浴，不要晃动，准确热激90秒后，立刻置于冰水浴中，静置2-3分钟。

4）向离心管中加入900 μl LB或SOC培养基，37℃水浴锅中静置10分钟。

5）150 rpm, 37℃振荡培养45分钟，使菌体复苏，抗性基因表达。

6）2,500 g离心5分钟，去掉900 μl上清。用剩余培养基将菌体重悬，用无菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀。室温正置10分钟。待菌液被平板吸收后，37℃倒置培养过夜。

 

【注】：也可直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存，一周之内都可重新涂板。