BL21 (DE3)化学感受态细胞

 产品信息

产品名称	产品编号	规格	储存
BL21 (DE3) Chemically Competent Cell BL21 (DE3)化学感受态细胞	11804YB80	100 μl × 10管	-80℃保存

 

BL21 (DE3)化学感受态细胞产品描述

本品是在大肠杆菌BL21（DE3）菌株基础上制备的化学转化感受态细胞，是以T7 RNA聚合酶为表达系统的基因的高效表达宿主，其基因型为F^-ompT hsdS (r_B^- m_B^-) gal dcm (DE3)。经检测，本品无外源质粒DNA残留，转化效率≥10⁷ cfu/μg pUC19 DNA。适合非毒性蛋白重组表达。

产品组分

编号	组分	产品规格
11804-A	BL21 (DE3)化学感受态细胞	100 μl × 10
11804-B	pUC19（0.1 ng/μl）	5 μl × 1

BL21 (DE3)化学感受态细胞运输和保存方法

干冰运输。

BL21 (DE3)化学感受态细胞-80℃保存，pUC19质粒≤-20℃保存。有效期半年。

BL21 (DE3)化学感受态细胞注意事项

1）感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用。

2）待转化DNA加入体积不要超过感受态细胞体积的1/10。

3）待转化DNA加入感受态细胞后，请勿用移液枪吹打，轻轻弹匀即可。

4）为确保最高效率转化，整个操作过程应尽量轻柔，并保持低温。

5）本品应于-80℃保存，请勿将感受态细胞储存于-20℃或液氮中保存。

6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1）将感受态细胞从-80℃中取出，置于冰水浴中融化。

2）将待转化DNA加入到100 μl感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育30分钟。

3）42℃水浴，不要晃动，准确热激90s后，立刻置于冰水浴中，静置2-3分钟。

4）向离心管中加入900 μl LB或SOC培养基，37℃水浴锅中静置10分钟。

5）150 rpm, 37℃振荡培养45分钟，使菌体复苏，抗性基因表达。

6）2,500 g离心5分钟，去掉900 μl上清。用剩余培养基将菌体重悬，用无菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀。室温正置10分钟。待菌液被平板吸收后，37℃倒置培养过夜。

 

【注】：也可直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存，一周之内都可重新涂板。