细胞凋亡抗体芯片技术的核心是一个三明治式的免疫反应(sandwich immunoassay)。针对某个凋亡因子的抗体被事先点印在膜,或者玻璃载片上,含有凋亡因子的样品和该抗体膜或者玻片结合,然后凋亡因子被生物素化的抗体混合液所识别。通过化学发光(chemiluminescence)或者荧光来完成检测。
细胞凋亡是由细胞内和胞外一系列的信号传导分子调控的。当胞外的TNF和Fas激活膜上的受体后,在细胞内就由促凋亡蛋白(Pro-apoptotic: BAX, BID, BAK, or BAD )和抗凋亡蛋白(Anti-apoptotic: Bcl-Xl and Bcl-2)相互作用,来决定细胞的最终命运。促凋亡蛋白会形成同型二聚体(Homodimers)来引发线粒体膜的通透性增加,使得Cytochrome c和SMAC得以释放到线粒体外,来诱发半胱氨酸蛋白酶(Caspase)的激活。研究证明p53在细胞凋亡中起着主要的调节作用。而p53调控的异常会改变凋亡的发生和发展。另外,IGFBP等其他蛋白质也参与到凋亡的调控中,使得凋亡相关蛋白形成了一个相互关联的网络。使用常规的方法显然很难从整体上来把握众多参与凋亡因子的表达水平。美国Raybiotech推出的人细胞凋亡抗体芯片就是来满足这种大规模蛋白表达研究的,可以同时来检测43种和凋亡有关的蛋白表达情况。 实验原理: 
产品特点: - 在一个实验中,同时检测出多达43种凋亡因子
- 不需要对每个因子进行蛋白印记或者免疫沉淀实验
- 不需要特殊的设备
- 试剂盒中有内参
- 灵敏度高(可检测出pg量的蛋白质)
- 经济,便宜,简单
- 特异性高 ,样品范围广 ,信号检测多样
试剂盒组分: - Human Apoptosis Antibody Array kit membranes (2, 4, or 8 membranes)
- 2X Cell Lysis Buffer (5 ml)
- Protease Inhibitor Cocktail (1 tube for 2-4 membranes, and 2 for 8 membranes)
- Blocking Buffer (25 ml for less 4 membranes and 50 ml for 8 membranes)
- 20X Wash Buffer I (30 ml)
- 20X Wash Buffer II (30 ml)
- Cocktail of Biotin-Conjugated Antibody Mix (1 tube for 2 membranes, 2 for 4 membranes,and 4 for 8 membranes)
- 1,000X HRP-Conjugated Streptavidin (18 μl)
- Detection Buffer C (1.5 ml for 2~4 membranes, 2.5 ml for membranes)
- Detection Buffer D (1.5 ml for 2~4 membranes, 2.5 ml for 8 membranes)
- Eight-Well Tray (1 each)
产品订购:
膜系列芯片: | | QAR-INF-1-1 | 1 slide; 16 sub-arrays | |
Quantibody® Rat Inflammation Array 1 (2) | QAR-INF-1-2 | 2 slides; 32 sub-arrays | |
Quantibody® Rat Inflammation Array 1 (4) | QAR-INF-1-4 | 4 slides; 64 sub-arrays | |
Q-Analyzer Software for QAR-CYT-1 | QAR-CYT-1-SW | 1 | |
Q-Analyzer Software for QAR-CYT-2 | QAR-CYT-2-SW | 1 | |
Q-Analyzer Software for QAR-CYT-3 | QAR-CYT-3-SW | 1 | |
Q-Analyzer Software for QAR-INF-1 | QAR-INF-1-SW | 1 |
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