Oxoid 胰蛋白胨试剂
英文名称: IMAGEN Enterovirus slide CE marked
型号:null    产品货号: S612530
价格:请致电:010-57128832,18610462672
品牌: 英国
试剂级别: 生化级

OXOID 胰蛋白胨试剂按生物体组织中所含有的或是在代谢过程中所产生的物质可分为氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸、酶、辅酶、糖类、酯类、***等;按生物学研究的需要可分为电泳试剂、色谱试剂、免疫试剂、标记试剂、组织化学试剂等。其优点主要包括:适用于各种大小的质粒(<14kb);高保真PCR酶和Dpnl酶同时升级;节约反应时间2/3,仅需半天;包含超级高效应感受态细胞,物超所值;精确、高效的突变,决无意外突变。
OXOID 胰蛋白胨现货供应中:
100克 Amresco
1公斤 Amresco
DL-精氨酸/DL-蛋白氨基酸/DL-胍基戊氨酸/DL-Arginine BR,98%,具刺激性 5克 Amresco 7200-25-1
25克 Amresco
100克 Amresco
1公斤 Amresco
L-精氨酸盐酸盐/L-盐酸蛋白氨基酸/L-盐酸胍基戊氨酸/盐酸L-精氨酸/L-Arginine HCL BR,99% 25克 Amresco 1119-34-2
100克 Amresco
1公斤 Amresco
L-精氨酸丁酸钡盐/L-精氨基丁二酸钡盐/L-精氨酸琥珀酸钡盐 98% 1克 Amresco
OXOID 胰蛋白胨详细说明书:
生物试剂 (BR:Biological reagent)涉及到化学试剂分类。我国的试剂规格基本上按纯度(杂质含量的多少)划分,共有高纯、光谱纯、基准、分光纯、优级纯、分析和化学纯等7种。国家和主管部门颁布质量指标的主要优级纯、分级纯和化学纯3种。(1)优级纯(GR:Guaranteed reagent),又称一级品或保证试剂,99.8%,这种试剂纯度最高,杂质含量最低,适合于重要精密的分析工作和科学研究工作,使用绿色瓶签。(2)分析纯(AR),又称二级试剂,纯度很高,99.7%,略次于优级纯,适合于重要分析及一般研究工作,使用红色瓶签。(3)化学纯(CP),又称三级试剂,≥ 99.5%,纯度与分析纯相差较大,适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色(深蓝色)标签。(4)实验试剂(LR:Laboratory reagent),又称四级试剂。除了上述四个级别外,目前市场上尚有:基准试剂(PT:Primary Reagent):专门作为基准物用,可直接配制标准溶液。光谱纯试剂(SP:Spectrum pure):表示光谱纯净。但由于有机物在光谱上显示不出,所以有时主成分达不到99.9%以上,使用时必须注意,特别是作基准物时,必须进行标定。纯度远高于优级纯的试剂叫做高纯试剂(≥ 99.99%)。
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OXOID 胰蛋白胨
本产品仅供科学研究使用
更多产品咨询请登录网站www.genegen.cn

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价格(元)

HieffTM First Strand cDNA Synthesis Super Mix for RT-qPCR

HieffTM第一条链cDNA合成Super Mix(用于RT-qPCR

11103YB70

200T

-20 ºC

 

 Hieff™ First Strand cDNA Synthesis Super Mix for RT-qPCR产品描述

HieffTM First Strand cDNA Synthesis Super Mix for RT-qPCR基于HieffTM Reverse TranscriptaseCat No. 11101ES84),该酶是在M-MLV (RNase H-) Reverse Transcriptase基础上经过多点突变得到的全新逆转录酶,热稳定性提高,50下活性最高,且可耐受高达55的反应温度,适用于具有二级结构的RNA模板的逆转录,能稳定可靠地合成cDNA

5 ×Super Mix中含有逆转录反应所需的所有组分 (BufferdNTPHieffTM Reverse TranscriptaseRNase inhibitorRandom primers/Oligo dT primer mix) ,加入模板RNA和水即可迅速进行反应。RNA模板的体积最多可加到总体积的80%,非常适合于低浓度RNA模板的逆转录反应。5 ×Super Mix-20℃不会冻结,使用方便。

该产品适用于两步法RT-qPCR检测,针对qPCR进行特别优化,比例优化的Random primers/Oligo dT primer mix,使cDNA合成可从RNA转录本的各个区域起始,最大程度保证了qPCR结果的可重复性。逆转录产物兼容SYBR®Green和探针法qPCR,可以根据实验目的,选择HieffTM qPCR SYBR® Green Master Mix (Cat No. 11201ES03/11202ES03/11203ES03)HieffTM qPCR TaqMan Probe Master Mix (Cat No. 11204ES03)等试剂配合使用,进行高性能的基因表达分析。

 Hieff™ First Strand cDNA Synthesis Super Mix for RT-qPCR产品组分

组分编号

组分名称

产品编号/规格

11103ES70 (200T)

11103-A

RNase free ddH2O

1 ml×2

11103-B

5 ×Super Mix a

400 μl

11103-C

5 ×Control Mixb

40 μl

包含BufferdNTPHieffTM Reverse TranscriptaseRNase inhibitorRandom primers/Oligo dT primer mix

除不含HieffTM Reverse Transcriptase外,其余成分与5 ×Super Mix相同,用于配制对照反应。 

运输与保存方法

冰袋(wet ice)运输。产品在-20 ºC保存,有效期2年。

质量控制

所有组分经检测均无核酸外切酶,核酸内切酶,RNase残留。

功能检测:1 pg-1 μg HeLa cell total RNA为模板,测试qRT-PCR性能。以6个数量级的模板量的对数值对Ct值做标准曲线,R2>0.990,斜率在-3.20-3.60之间。

客户需要准备的材料

RNase free1.5 ml微量离心管或0.2ml PCR

水浴锅或PCR

RNA(高质量的完整的RNA对于获得高质量的cDNA是至关重要的)

 Hieff™ First Strand cDNA Synthesis Super Mix for RT-qPCR

应用实例

1. RNase free离心管中配制如下混合液,用移液器轻轻吹打混匀。

RNase free ddH2O

to 10 μl

5 ×Super Mix

2 μl

模板RNA

Total RNA: 1 pg-500 ng

2. 对照反应(可选)

对照反应是指不加逆转录酶的逆转录阴性对照反应,用于检验RNA模板中是否有基因组DNA残留。在RNase free离心管中配制如下混合液,用移液器轻轻吹打混匀。

RNase free ddH2O

to 10 μl

5 ×Control Mix

2 μl

模板RNA

Total RNA: 1 pg-500 ng

3. 按下列条件进行第一链合成反应:

标准程序(可获得高质量的cDNA

25

10 min

42

30 min

85

5 min

或快速程序(适用于大多数RT-qPCR实验,效果与标准程序相当)

42

15 min

85

2 min

4. cDNA产物可在-20储存或立即用于qPCR反应。

第一链cDNA产物可直接用作qPCR反应的模板。建议作为模板的cDNA产物的体积不超过qPCR反应体积的1/10

可选择选择HieffTM qPCR SYBR® Green Master Mix (Cat No. 11201ES03/ 11202ES03/ 11203ES03) HieffTM qPCR TaqMan Probe Master Mix (Cat No. 11204ES03)作为qPCR试剂。

注意事项

15 ×Super Mix5 × Control Mix含有高浓度的甘油,在使用前请短暂离心收集到反应管底部,并用移液枪轻轻吸打充分混匀后,准确吸取。

210 μl逆转录反应体系建议加入不超过500 ngTotal RNA。如果目的基因表达量非常低,最多加入1 μg Total RNA,否则加入RNA量过高,可能会超出后续定量PCR的线性范围。反应体积可根据需要等比例放大。

3)如果加入RNA模板体积较大 (如超过2 μl),请确保RNA是溶于水中而不是TE中,因为TE中的EDTA会对gDNA去除以及逆转录反应产生抑制。

4 如果在qPCR实验中发现对照反应的Ct值与实验组相差<5,则说明RNA模板有可能污染基因组DNA。此时可选择HieffTMFirst Strand cDNA Synthesis Super Mix for RT-qPCR(+gDNA wiper) (Cat No. 11104ES70),以彻底消除基因组DNA背景。

 

5)逆转录反应的快速程序适合于大多数RT-qPCR实验。一般情况下,结果与标准程序没有显著可见的差异。如果使用快速程序,发现目的基因的扩增效率较差,或者Ct值过大,则改用标准程序,以提高cDNA的产量。