| XL10-Gold化学感受态细胞 英文名称： XL10-Gold Chemically Competent Cell | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 型号:null 产品货号： 11810ES80 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 价格:请致电：010-57128832,18610462672 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 品牌: yeasen | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化学感受态细胞 产品信息
产品描述 XL10-Gold化学感受态细胞是经特殊工艺处理得到的感受态细胞，特别适合于大分子量DNA的高效转化。具有四环素和氯霉素抗性，使用Puc19质粒测得其转化效率达108cfu/μg，主要具有如下特点： ①Hte表型可增强较大分子量质粒和连接产物的高效转化； ②具有限制性内切酶缺陷性，更利于克隆 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取； ③更适于质粒文库的构建； ④具有lacIqZΔM15，可用于蓝、白斑筛选。 本品基因型： TetrΔ(mcrA)183Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lacHte [F´proABlacIqZΔM15 Tn10 (Tetr) Amy Camr]。 产品组分
运输与保存方法 干冰运输。 XL10-Gold化学感受态细胞-80℃保存，pUC19质粒-20℃保存。有效期半年。不能保存于液氮！ 注意事项 1）感受态细胞应保存在-80℃，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。 2）整个转化操作，严格根据相应温度及无菌条件要求进行。 3）为确保最高转化效率，整个操作过程应尽量轻柔，并保持低温，且每次转化感受态使用量，不低于100μl。 4）为防止转化不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化，最低化实验可能遇到的风险。 使用方法 1）取100μl感受态细胞置于冰浴中融化。 3）置于42℃水浴中热激30s，然后快速将管转移到冰浴中，冷却2-3min，该过程不要摇动离心管，否则会降低转化效率。 4）向离心管中加入900μl 42℃预热的无菌NZY+培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床振荡培养1h（225-250rpm），目的是促使菌体复苏。 5）取上述≤200μl转化产物涂至含有相应抗生素的LB固体平板上，将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。 【注】：如需做蓝白斑筛选，需至少孵育17h，以充分显色。 附录一：常用抗生素工作浓度
10 g of NZ amine (casein hydrolysate) 5 g of yeast extract 5 g of NaCl Add deionized H2O to a final volume of 1 liter Adjust to pH 7.5 using NaOH and then autoclave Add the following filer-sterilized supplements prior to use: 12.5 ml of 1 M MgCl2 12.5 ml of 1 M MgSO4 20 ml of 20% (w/v) glucose (or 10 ml of 2 M glucose) 相关产品
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