Rosetta(DE3)Chemically Competent Cell

Rosetta(DE3)化学感受态细胞

产品信息

产品名称	产品编号	规格	储存	价格（元）
Rosetta(DE3)Chemically Competent Cell  Rosetta(DE3)化学感受态细胞	11806ES80	10×100 μL	-80℃	288.00

产品描述

本品是在具有大肠杆菌BL21菌株基础上制备的化学转化感受态细胞，补充大肠杆菌缺乏的6种稀有密码子（AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA）对应的tRNA，提供外源基因（尤其是真核基因）在原核系统中的表达水平。经pUC19质粒检测， 转化效率可达10⁸ cfu/μg DNA。本品具有氯霉素Cam^R抗性。

Rosetta(DE3)基因型：F^-ompT hsdS_B(r_B^-m_B^-)gal dcm (DE3) pRARE(argU,argW,ilex,glyT,leuW,proL)(Cam^R)

产品组分

编号	组分	规格
11806-A	Rosetta(DE3)化学感受态细胞	10×100 μL
11806-B	pUC19 (0.1 ng/μl)	1×5 μL

运输与保存方法

干冰运输；Rosetta(DE3)感受态细胞-80℃保存；pUC19质粒-20℃保存。

注意事项

1）本产品应保存在-80℃，不可反复冻融，以免降低感受态细胞的转化效率。

2）本产品在冰中解冻时间不宜过长，感受态刚化冻时转化效率最高。

3）本产品使用传统转化方法转化效率约10⁸ cfu/μg DNA，使用快速转化方法转化效率约10⁷ cfu/μg DNA。

使用方法（快速转化方法）

1）取100 μL感受态细胞冰浴融化。

【注】：一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μL，融解后的感受态不建议二次使用。所加DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。

2）向感受态细胞悬液中加入目的DNA，轻轻旋转离心管混匀，冰浴静置5 min（传统：30 min）。

3）42℃水浴中热激30 s，然后快速将管转移到冰上，静置2 min。（热激时间不要超过30s）

4）向感受态中加入100 μL左右不含抗生素的LB或SOC培养基，混匀（传统：37℃摇床温育45 min）。

5）将全部菌液涂布至培养板中，37℃培养12-16 h。

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