yeasenBrand,null 产品货号： 10113ES60Item#, UNICON™ HotStart Taq DNA Polymerase （抗体法热启动Taq酶）<br>英文名称： UNICON™ HotStart Taq DNA Polymerase （抗体法热启动Taq酶）

UNICON™ HotStart Taq DNA Polymerase

（抗体法热启动Taq酶）

产品信息

产品名称	产品编号	规格	储存	价格（元）
UNICON™ HotStart Taq DNA Polymerase （抗体法热启动Taq酶）	10113ES60	100 U	-20℃	216.00
UNICON™ HotStart Taq DNA Polymerase （抗体法热启动Taq酶）	10113ES76	500 U	-20℃	656.00

产品描述

UNICON™ HotStart Taq DNA Polymerase是UNICON™ Taq抗体和Hieff™ Taq DNA Polymerase（货号：10101ES）的混合产品。UNICON™ Taq抗体与Hieff™ Taq DNA Polymerase具有很高的亲和力，高温50℃处理30 min，依旧可以封闭Hieff™ Taq DNA Polymerase的活性。本品在预变性温度下加热30 sec完全失活，释放出DNA聚合酶活性。使用该热启动taq酶可以有效抑制引物非特异性退火导致的扩增。

UNICON™ HotStart Taq DNA Polymerase适用于热启动PCR和qPCR。本品中的Hieff™ Taq DNA Polymerase是热稳定重组型DNA聚合酶，具有较高的模板亲和力，非常适合低拷贝模板的扩增。扩增产物具有3′-dA，可轻松克隆用于T载体。

产品组分

编号	组分	产品编号/规格
编号	组分	10113ES60（100 U）	10113ES76（5×100 U）
10113-A	5×UNICON™ HotStart Taq Buffer (Mg²⁺ Plus)	1 mL	5×1 mL
10113-B	dNTP Mix (10 mM each)	100 μL	5×100 μL
10113-C	UNICON™ HotStart Taq DNA Polymerase (5 U/μL)	20 μL	5×20 μL

产品应用

低拷贝基因扩增、基因型鉴定、菌落PCR

活性定义

用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，74℃，30 min内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。

质量控制

DNA聚合酶活性封闭性检测：在1×UNICON™ HotStart Taq Buffer (Mg²⁺ Plus)中，65℃孵育30 min，活性释放低于5%。

DNA聚合酶活性释放检测：在1×UNICON™ HotStart Taq Buffer (Mg²⁺ Plus)中，95℃加热30 sec，活性释放高于95%。

核酸外切酶残留检测：20 μL反应体系，10 U本品和0.6 μg λ-HindIII，74℃孵育1 h，DNA的电泳谱带无变化。

核酸内切酶残留检测：20 μL反应体系，10 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA，74℃孵育1h，DNA电泳谱带无变化。

大肠杆菌残留DNA检测: 50 μL体系中，加入2U本品，以无菌ddH₂O为模板，扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。

运输与保存方法

冰袋运输。-20℃保存。

PCR反应体系（50 μL）

组分	体积	终浓度
ddH₂O	to 50 μL	-
5×UNICON™ HotStart Taq Buffer (Mg²⁺ Plus)	10 μL	1×
dNTP Mix (10 mM each)	1 μL	0.2 mM
模板DNA	适量	-
引物正向(10 μM)	2 μL	0.4 μM
引物反向(10 μM)	2 μL	0.4 μM
UNICON™ HotStart Taq DNA Polymerase (5 U/μL)	0.5 μL	2.5 U/50 μL

【注】：1) 试剂使用：各组分使用前需充分融化混匀。

2) 聚合酶浓度：推荐使用2.5 U/50 μL。可以在1.25-5 U/50 μL之间进行优化。

3）PCR Enhancer使用：推荐仅当扩增片段GC含量>60%且优化条件也无法正常扩增时使用。

4）Mg²⁺终浓度：体系终浓度为2 mM。如有特殊需要，可用25 mM MgCl₂，以0.2-0.5 mM为间隔向上摸索。

5) 不同模板的推荐使用量（50 μL反应体系）：

模板种类	模板使用量
基因组DNA	50 ng-200 ng
质粒DNA	100 pg-20 ng
cDNA	1-5 μL (不超过反应体系的1/10)

PCR扩增程序

循环步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	5 min	1
变性	95℃	30 sec
退火	50-60℃	30 sec	35
延伸	72℃	30 sec/kb
终延伸	72℃	10 min	1

【注】：1) 退火温度和时间：温度推荐使用50-60℃。退火温度过低会导致非特异性扩增。引物设计参考荧光定量引物标准。推荐退火时间设置为30 sec，可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。也可根据需要，设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度和时间。

2) 延伸温度和时间：温度推荐使用72℃。时间推荐使用30 sec/kb。

3) 扩增产物：请将PCR扩增产物放置于-20℃保存，防止DNA发生降解。

注意事项

1）推荐使用本公司PCR Enhancer （货号：10117ES），以扩增高GC含量的目的基因。

2）推荐使用本公司Hieff Clone^TM （货号：10907ES和10908ES），以进行快速TA克隆。

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。