yeasenBrand,null 产品货号： 10104ES72Item#, 改进型DNA聚合酶<br>英文名称： HieffTM Taq Plus DNA Polymerase

Hieff^TM Taq Plus DNA Polymerase

改进型DNA聚合酶

产品信息

产品名称	产品编号	规格	储存	价格（元）
Hieff^TM Taq Plus DNA Polymerase 改进型DNA聚合酶	10104ES72	250 U	-20℃	120.00
Hieff^TM Taq Plus DNA Polymerase 改进型DNA聚合酶	10104ES82	5×250 U	-20℃	540.00

产品描述

Hieff^TM Taq Plus DNA Polymerase是Hieff^TM Taq DNA Polymerase与一种含有3’→5’外切酶活性的DNA聚合酶组成的混合酶。其保真性是Hieff^TM Taq DNA Polymerase的6倍。对于≤5 kb的目的片段，Hieff^TM Taq Plus DNA Polymerase具有更强的扩增性能，可以得到更高的扩增产量。有些Hieff^TM Taq DNA Polymerase不能扩增的片段，Hieff^TM Taq Plus DNA Polymerase可以正常扩增。PCR产物的3’ 端带A，可直接克隆至T载体。

产品组分

编号	组分	产品编号/规格
编号	组分	10104ES72(250 U)	10104ES82(5×250 U)
10104-A	Hieff^TM Taq Plus DNA Polymerase (5 U/μL)	50 μL	5×50 μL
10104-B	2× Hieff^TM Taq Plus Buffer (含Mg²⁺,dNTPs)	7×1 mL	35×1 mL

活性定义

用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，74℃, 30 min内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。

质量控制

核酸外切酶残留检测：20 μL反应体系，10 U本品和1 μg λDNA -HindIII，37℃下孵育4 h，DNA的电泳谱带无变化。

核酸内切酶残留检测：20 μL反应体系，10 U本品和1 μg λDNA，37℃温育4 h，DNA的电泳谱带无变化。

大肠杆菌残留DNA检测: 50 μL体系中，加入2 U本品，以无菌ddH₂O为模板，扩增E.coil 16s rDNA 基因。30个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。

运输与保存方法

冰袋运输。-20 ºC保存，有效期1年。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

PCR反应体系（推荐冰上配制）

组分	体积	终浓度
ddH₂O	to 50 μL	-
2×Hieff^TM Taq Plus Buffer (含Mg²⁺,dNTPs)	25 μL	1×
DNA模板	适量
Primer正向 (10 μM)	2.5 μL	0.5 μM
Primer反向 (10 μM)	2.5 μL	0.5 μM
Hieff^TM Taq DNA Polymerase(5 U/μL)	0.2 μL	1 U/50 μL

【注】： 1) 试剂使用：使用前要充分融化混匀。

2) 聚合酶浓度：推荐使用1 U/50 μL。可以在0.5-2 U/50 μL之间进行优化，请勿超过2 U/50 μL。

3）Mg²⁺终浓度：体系终浓度为1.5 mM。如有特殊需要，可用50 mM MgCl₂，以0.2-0.5 mM为间隔向上摸索。

4) 不同模板的推荐使用量（50 μL反应体系）：

模板种类	用量
人基因组DNA	0.1-1 μg
大肠杆菌基因组DNA	10-100 ng
λDNA	0.5-5 ng
质粒DNA	0.1-10 ng

PCR扩增程序

循环步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	5 min	1
变性	95℃	30 sec	30-35
退火	55℃	30 sec
延伸	72℃	30 sec/kb
终延伸	72℃	7 min	1

【注】：退火温度需要根据引物退火温度调整，一般设置成低于引物退火温度1-2℃即可。

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HB170523