纯化线粒体细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒 英文名称: 无 |
型号:null 产品货号: HL10014.2 |
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品牌: 进口/国产 |
中文名称 纯化线粒体细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒 货 号: 规 格:20次
纯化线粒体细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒 技术背景参考: 在男科学(Andrology)中,精子(spermatozoa)分析提供了精子生成(spermatogenesis)、精子寿命、以及生育能力的基础信息。其中精子的活力(vitality)、运动能力(motility)、授精潜力(fertilizing potential)、膜结构或染色质结构完整性(integrity)、顶体反应(acrosomal reaction)功能的评价是精子分析的重要指标,也是决定人工受孕或体外授精(in vitro fertilization;IVF)的重要参数。其中顶体反应,是指当精子接近卵子实施授精时,精子头部前半端的帽状结构顶体,释放出溶解酶,以便精子和卵子的膜融合。顶体反应测试是一项稳定的精子功能参数,可以用于预测受精成功率。
实验步骤参考: 移取新鲜获得的1毫升精液(48小时内)到1.5毫升离心管 放进37培养箱孵育30分钟 放进微型台式离心机离心5分钟,速度为600g 小心抽去上清液 加入xx毫升保存液(Reagent A),混匀颗粒群 在血细胞计数器上进行精子细胞计数,并调整到2 × 107精子细胞/毫升 移取100微升精子细胞到新的1.5毫升离心管 加入xx微升染色液A(Reagent B),混匀 室温下孵育5分钟,避免光照 放进微型台式离心机离心5分钟,速度为600g 小心抽去上清液 加入xx微升清理液(Reagent C),混匀颗粒群 放进微型台式离心机离心5分钟,速度为600g 小心抽去上清液 重复实验步骤12至14一次 加入xx微升保存液(Reagent A),混匀颗粒群 即刻移取20微升到洁净的载玻片一端 用盖玻片或另一个载玻片推片 置于空气中凉干 加上xx微升预冷的固着液(Reagent D),覆盖样品表面 室温下孵育1分钟 小心抽去固着液 小心加上xx微升染色液B(Reagent E),覆盖样品表面 室温下孵育20分钟,避免光照 小心抽去染色液 小心加上xx微升清理液(Reagent C),覆盖样品表面 小心抽去清理液 盖上盖玻片或封片液 即刻在(共聚焦)荧光显微镜下观察并计数(注意:每个视野计数200个精子)
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