中国/美国<br>试剂级别：分子生物学级Brand,null 产品货号： xy1012650Item#, Animal Tissue Direct PCR Kit 动物组织直接PCR试剂盒<br>英文名称： Animal Tissue Direct PCR Kit

Animal Tissue Direct PCR Kit 动物组织直接PCR试剂盒 产品描述

动物组织直接PCR试剂盒是一种可直接对不同动物组织进行PCR扩增的试剂盒，适应性广、稳定性强。试剂盒中采用独特的裂解缓冲液体系，可以简便快速的裂解多种动物组织样品并释放出基因组DNA。整个过程不需要除去蛋白、RNA及其它次生代谢物，也无需有机溶剂抽提，即可得到质量稳定的基因组DNA，无需后续纯化步骤即可直接用于PCR反应。而且样品需求量小，少到5mg动物组织即可进行实验。

试剂盒中提供的 Tissue Master Mix 具有很强的扩增兼容性，能直接以待测样品裂解液为模板，进行高效特异性扩增。该试剂为2倍浓缩PCR反应混合物，包含了用于PCR扩增除模板和引物外的所有组分，并以dUTP替代了dTTP，另外加入了能够降解含有dUTP 模板的 UNG 酶(Uracil-N-glycosylase)。在PCR反应前，利用UNG酶降解含有尿嘧***的PCR产物，UNG 酶对不含有尿嘧***的模板不会造成任何影响，从而保证扩增的特异性和准确性，防止了大规模基因检测时可能出现的PCR产物污染问题。优化的2×Tissue Master Mix与直接裂解液配合使用能够快速简便地对样品进行检测，并具有灵敏度高、兼容性强、特异性强、稳定性好等特点。

该试剂盒可用于转基因型鉴定、动物基因分型等多种大规模基因检测。运输方法

冰袋（wet ice）运输。

Animal Tissue Direct PCR Kit 动物组织直接PCR试剂盒 保存方法

① 本试剂盒的10126-A【2×Tissue Master Mix】保存在-20℃，避免反复冻融。

② 10126-B【】在常温干燥条件下，可保存12个月，如需保存更长时间可置于4℃。

③ 10126-C【Protease】溶液具有独特配方，常温保存（25℃）可长期具有活性，在4℃保存，其活性和稳定性会更好，因此建议将其置于在4℃保存，请勿置于-20℃保存。

Animal Tissue Direct PCR Kit 动物组织直接PCR试剂盒 注意事项

1）本试剂盒适用于常规PCR，请勿用于多重PCR鉴定；建议扩增片段在1kb以内。

2）注意实验用具的清洁以及实验的操作手法，避免样本间的交叉污染。

3）建议采用新鲜采取的动物组织，若为长期冷冻组织，应尽量避免反复冻融，否则会导致模板的降解，影响PCR效率。

4）Buffer AL若低温保存，容易产生沉淀。在使用前务必将其在室温中放置一段时间，也可在37℃水浴中预热10min，以溶解沉淀，混匀后再使用。

5）电泳检测时，切勿使用含有 SDS 的 Loading Buffer，否则在电泳时会在泳道中出现一大团拖尾亮带，影响实验结果。

6）建议设立阳性及阴性对照反应。阳性对照可用50ng纯化的动物DNA为模板，阴性反应以ddH₂O为模板，引物可采用以前成功扩增的引物。

7）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

Animal Tissue Direct PCR Kit 动物组织直接PCR试剂盒 操作方法

1. 取5-10mg动物材料，置于离心管中。尽量剪碎动物材料，以使之后的酶解反应容易进行。

2. 取100μl Buffer AL并加入4μl Protease，涡旋混匀。

3. 向混合液中加入动物组织，涡旋混匀。

4. 65℃孵育10-30min，然后95℃处理5min。

【注】：65℃孵育，一般只需10min即可满足多数PCR需求。若需要的DNA量较大或样品较难酶解，可以将时间延长至30min。组织块不需完全酶解，残余的部分在后续离心步骤中可被除去。

5. 12,000 rpm (~13,400×g )离心5min。

6. 转移上清至新的离心管，4℃或-20℃放置备用或直接用于PCR扩增。

【注】：用于后续PCR检测时，模板量占PCR体系的1-10%之间最佳，不能超过20%。如50μl 的PCR体系中，加入0.5-5μl 裂解液即可，但不能超过10μl。

7. PCR反应体系配制*

按照下表配制PCR反应体系，配置好反应体系后，短暂涡旋充分混匀并瞬时离心，将所有试剂收集到管底。