2×Hieff™ PCR Master Mix(No dye) 产品描述

PCR Master Mix(No dye)是即用型的常规PCR预混合溶液，含有Taq DNA Polymerase，dNTP混合物，MgCl₂以及优化的缓冲体系，只需加入引物和模板即可进行扩增，大大简化实验的操作步骤，提高了高通量操作和实验结果的重现性。

体系中不含有溴酚蓝染料，其中的保护剂使得Master Mix 4ºC条件下长期放置，或经过反复冻融后仍可维持酶的活性以及产品的稳定性。PCR产物具有3’-dA突出端，可轻松克隆至T载体。

 2×Hieff™ PCR Master Mix(No dye) 运输与保存方法

冰袋（wet ice）运输。收到产品后放到-20 ºC保存。

 2×Hieff™ PCR Master Mix(No dye) 活性定义
用活性化的大马哈鱼精子作为模板/引物，在74ºC，30min内摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。
 2×Hieff™ PCR Master Mix(No dye) 质量控制
核酸外切酶残留检测：20 μl本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：20 μl本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中，以ddH₂O为模板，扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。
功能检测：50 μl体系中，以100 ng人基因组DNA为模板扩增α-1-antitrypsin基因。30个循环后取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，观察到单一的360 bp条带。
 2×Hieff™ PCR Master Mix(No dye) 稳定性检测：

 

图1. 2 ×Hieff^TM PCR Master Mix分别在-20 ºC放置1年、4 ºC放置3个月、25 ºC放置1个月后，菌落PCR扩增1.2 kb片段。电泳结果显示2 ×PCR Master Mix具有非常好的稳定性。