β-D-阿洛糖2595-97-3
英文名称: 2595-97-3
型号:null    产品货号: QY-VE661
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品牌: 进口国产

 β-D-阿洛糖2595-97-3

产品货号:QY-VE661
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用途:科研实验等领域科学研究,不得用于临床诊断。
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温馨提示:不可用于临床治疗。

sp;染色过程简单 
与 EB 一样,在预制胶和电泳过程中不必担心染料降解;而电泳后染色过程也只需 30 分钟且无需脱色或冲洗 
gelred 对 DNA 和 RNA 的迁移影响极小 
对核酸迁移的影响小于 SYBR Green I 
gelred 与标准凝胶成像系统以及可见光激发的凝胶观察装置完美兼容 
使用 312nm 激发的 UV 凝胶成像系统时, GelRed 可以完美的替代 EB ;使用 254nm 激发的 UV 凝胶成像系统或可见光激发的凝胶观察装置时, GelGreen 足以替代任意一种 SYBR 染料(见图 4 中的光谱图)

Biotium公司的GelRed 和 GelGreen 无论用于预制凝胶染色还是凝胶电泳后染色,都表现出了极高的灵敏度。为配合 312 nm UV 凝胶成像系统而设计的 GelRed ,在使用了我们新开发的具有专利的试验步骤后(该试验步骤中使用稀释的 NaCl 溶液替代传统的 TBE 缓冲溶液),在凝胶电泳后染色中优于或者至少相当于 SYBR Gold 。但与 SYBR Gold 不同, GelRed 在预制凝胶中使用时仍然有极高的灵敏度,事实上GelRed 在检测低浓度、微量 DNA 方面比 EB 表现出更高的灵敏度,尤其对小分子量的 DNA 检测非常灵敏(图1)。 GelGreen 可以满足使用 488 nm 激光凝胶扫描仪或者可见光激发的 Dark Reader 的研究人员的使用要求。 GelGreen 无论是在预制凝胶还是凝胶电泳后染色中都与 SYBR Green I 灵敏度相当,但不存在后者的不稳定性问题。实际上, GelRed 和 GelGreen ,特别是 GelRed 非常稳定,可以长期在室温下保存。当这两种染料稀释在 TBE 或者类似的电泳缓冲溶液中时甚至可以使用微波炉加热,便于采用常规方法制备预制凝胶。含有染料的预制凝胶可以成批制备,长期保存。

同样重要的是, GelRed 和 GelGreen 相比 EB 或 SYBR Green I 提高了安全性。 独立的测试服务公司( Litron Laboratories, Inc. )进行的标准艾姆斯氏测试结果表明, 在 18.5 μ g /mL (该浓度远高于推荐用于电泳后染色的 约 4 μ g/mL 的 3X 染色液 )浓度下, GelGreen 没有诱变性,而 GelRed 也仅在 S9 代谢活化时有微弱的诱变性。 GelRed 和 GelGreen 的特殊化学结构使其难以穿透细胞膜进入细胞,正是这一特性降低了染料的细胞毒性。如图3。相反, SYBR Green I 广泛地用于活细胞线粒体和核 DNA 染色,这正是由于它能快速的被细胞吞入。由于已知 SYBR Green I 对紫外线导致的突变有强烈的增强作用( Ohta et al. Mutat. Res. 492 , 91(2001) ),因此它的高细胞膜透性使它在紫外环境观察时成为凝胶染色的主要有害物质。

 

安全性测试

 
  SYBR Dyes GelRed GelGreen  
A) 5 min. incubation gelred,gelgreen,核酸染料,EB替代品 gelred,gelgreen,核酸染料,EB替代品 gelred,gelgreen,核酸染料,EB替代品
要想让DNA染色剂安全,唯一的办法就是设法不让其穿透细胞膜进入活体细胞内,Biotium 做到了!
B) 30 min incubation gelred,gelgreen,核酸染料,EB替代品 gelred,gelgreen,核酸染料,EB替代品 gelred,gelgreen,核酸染料,EB替代品

图 3. 在37°C下,分别使用1X SYBR Green I, SYBR Safe, GelRed and GelGreen 对HeLa 细胞进行孵化,并分别在5分钟(A)和30分钟(B)后观察。实验显示SYBR染料迅速进入细胞并将细胞内的核酸染成亮绿色(以上仅图示 SYBR Green 1),而 GelRed 和 GelGreen 则因为不能穿透细胞膜而完全没有进入细胞内, 足以证明GelRed和GelGreen是安全的。

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图 4. GelGreen (绿色) GelRed (红色)在 PBS 缓冲溶液中结合 dsDNA 后的激发和发射光谱。
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图 5. 室温下, GelRed TM ( 500 nm )和 SYBR Gold ( 488 nm )稀释在 1 × TBE 凝胶染色液中测得的吸光度随时间变化图。 GelRed 和 SYBR Gold 初始的吸光度值分别为 0.029 和 0.051 。