5）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

6）规格：1mL冻存管包装

 

运输和保存：干冰运输，收到后立即液氮冻存。

细胞使用：仅供科研使用。

 

细胞培养步骤

 

1）准备完全培养基：ECM内皮培养基(Sciencell)+10%FBS+1%P/S，细胞因子：ECM内皮因子（1：100）+4uM/ml L-Glu+90U/ml肝素。

2）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在370C水浴中迅速振荡解冻，加入9mL 完全培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL完全培养液后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含有5mL完全培养基、胶原包被的T-25培养瓶中静置培养（切勿移动）。48小时后换液并检查细胞密度。

3）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，既可进行传代培养：

1.弃去培养液，用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。

2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，放于37℃培养箱中反应1-2分钟，然后在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。

3.按3ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL完全培养液后吹匀。

4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含5mL完全培养基的胶原包被的T-25培养瓶中。

 

注意事项： 

1. 收到细胞后，若发现冻存管瓶盖脱落、破损或已融化及细胞有污染，请及时与我们联系。

2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。