克隆一号 英文名称: Magic Cloning |
型号:null 产品货号: LTF-00001 |
价格:请致电:010-57128832,18610462672 |
品牌: 湖南 |
莱拓福克隆一号是一种全新的,颠覆传统理念与方法的DNA克隆,基因融合,与靶向突变的分子生物学技术;提供最快,最方便和最有效的基因克隆,基因融合,与靶向性点突变的试剂与方法。 技术咨询:李经理15073481544 销售咨询:吴经理18673139001
操作步骤: 1.用PCR制备插入片段,用酶切线性化载体,纯化 2.制备反应体系(1.5ml 离心管): 克隆一号: 1 ul 载体 + 插入片段 + 水: 4 ul 3.室温(20-25度)孵育 5 分钟 4.冰上孵育10 分钟 5.加入感受态细菌50-100ul 6.冰上孵育30 分钟 7.热休克 90 秒 8.冰上速冻30秒 9.加 LB 培养基 0.8 ml 10.震动培养1小时 11.铺板,37度培养过夜 12.或者: 可冰上孵育5分钟(第六步),即刻铺板。若如此,以抑菌霉素(如卡那霉素)为佳。若用氨苄霉素,宜适量降低浓度。 优点: •高效,98-100% 阳性克隆 •快速,容易操作,不需要任何经验 •无内切酶位点限制 •可进行多片段、大片段DNA克隆 •特别适用于位点特异性靶向突变 •也特别适用于构建融合蛋白表达载体 •克隆片段的方向可控,可选择性进行正向或反相克隆。 |