超敏基因组PCR扩增检测试剂盒(普通型)
英文名称: SinoBio Genotyping PCR Kit
型号:null    产品货号: E008-01A
价格:请致电:010-57128832,18610462672
品牌: sinobio

SinoBio Genotyping PCR Kit
超敏基因组PCR扩增检测试剂盒(普通型)

普通型

Quick Load型(含上样染料)

E008-01A

100(20μl)

120

E008-2A

100(20μl)

120

E008-1B

A包装×5

540

E008-2B

A包装×5

540

产品描述:
超敏基因组PCR扩增检测试剂盒(Genotyping PCR Kit)专门为基因组及微量DNA PCR扩增检测设计优化,可从少量基因组模板中高效扩增出0.2kb4kb的目的条带,其灵敏度为普通PCR反应的10010,000倍。适用于基因组PCR扩增、微量模板、复杂模板等的扩增和大规模基因检测。本产品包括2X反应缓冲体系和酶2个独立的组分,其2X Reaction Mix包含了genotyping PCR所需的全部试剂、dNTPPCR增强剂。本产品使用方便快捷,使用时只需在2X Reaction Mix加入引物、模板及酶并加入去离子水稀释至1X即可进行反应。2X Reaction Mix提供不含染料/含染料(蓝色)两种形式供您选择,经测试,染料的加入不影响扩增性能。2X Reaction Mix中预混蓝色染料的,在配置反应体系时,可很方便地检测各组分混匀情况,在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。

产品用途:
本品适用于从复杂背景中扩增微量模板DNA。由于Genotyping PCR的突变率高于普通PCR反应,故其产物不推荐用于需高保真的基因克隆。Genotyping PCR所用引物需精心设计,否则会扩增出较多杂带(参见PCR引物设计的黄金法则)。

使用说明:
经测试按右侧反应体系及PCR程序可获得理想的扩增结果。推荐将此反应体系及PCR程序作为条件优化的初始反应。

扩增灵敏度检测对比

普通Taq酶扩增系统(上图) vs 超敏基因组PCR扩增检测系统(下图):
用浓度为100ng/μl的人基因组DNA将浓度1ng/μlLacZ基因的质粒梯度稀释至一下浓度梯度:

1

2

3

4

5

6

0.1ng/μl

0.01ng/μl

1pg/μl

0.1pg/μl

0.01pg/μl

1fg/μl

从每个浓度梯度中各取1μl作为扩增模板,分别用普通Taq酶扩增系统(上图) 及超敏基因组PCR扩增检测系统(下图)对LacZ基因进行扩增(都分别进行40PCR扩增循环)。
结果显示:超敏基因组PCR扩增检测系统检测灵敏度比普通Taq酶扩增系统高1,000倍以上。
泳道M DL2000 DNA Marker
泳道16:分别对应以上各模板浓度梯度

 

产品内容:

Taq DNA 聚合酶 5U/μl

30μl

2X GT PCR Reaction Mix

1m


质量保证:
使用推荐体系及PCR程序(见下),可从100ng人基因组DNA背景中扩增检测出1fg LacZ质粒模板的存在。
超敏基因组PCR扩增检测反应体系:

2X Reaction Mix

10μl

上游引物

0.05μM(终浓度)

下游引物

0.05μM(终浓度)

模板DNA

13μl DNA样品

Taq酶(5U/μl

0.25

ddH2O

20μl

*反应体系可成比例调整至50μl等体积

超敏基因组PCR扩增检测PCR程序

93

1分钟30

40次循环:

9330
57
30
57适用于大多数反应
亦可在5560间调整)
65
,按产物长度60/1kb
计算