产品描述: SinoBio Taq Plus DNA聚合酶是Super Taq DNA聚合酶和Fast Pfu DNA聚合酶按特定比例混合而成。Super Taq Plus DNA聚合酶具有Super Taq DNA聚合酶所有的特点:扩增快速、高灵敏度、抗干扰能力强等,同时由于Fast Pfu 酶的存在,具有一定的保真特性, 能部分纠正DNA扩增过程中所出现的错误。与Super Taq DNA聚合酶相比,具有扩增长度增加(简单模板扩增长度可达30kb,复杂模板可有效扩增10kb), 保真度好的特点;与Fast Pfu DNA聚合酶相比,具有扩增速度更快,扩增灵敏度更高的优点。 产品用途: 1)可替代大部分Super Taq DNA聚合酶的用途; 2)需高灵敏度的PCR扩增; 3)大片段PCR扩增反应 (可达30 kb); 使用建议: 使用本制品扩增得到的PCR产物具有3'端"A"突出,可直接克隆于T-Vector中。 图例一) 5 0 μ l 扩增体系中,分别以100ng~0.1ng小鼠基因组DNA为模板,可很好地扩增出1.1kb DNA片段(IL-1b基因)。 模板量: 泳道M:DL2000 DNA Marker 泳道1:100ng; 泳道2:10ng; 泳道3:1ng; 泳道4:0.1ng; | 
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| 产品包装: SinoBio Super Taq Plus酶(5U/ul) | 50μl | dNTP混合液(各10mM)* | 200μl | 10×Super Taq Plus Buffer with Mg2+ | 2ml | *E032-02系列不含dNTP混合液 |
质量保证: 经多次柱纯化,SDS-PAGE检测纯度大于95%; PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。 活性定义: 在74oC条件下,30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。 常用反应体系(50μl) 10× Super Taq Plus Buffer | 5μl | 上游引物 | 0.2-1.0μM(终浓度) | 下游引物 | 0.2-1.0μM(终浓度) | dNTP(各10mM) | 1.0μl | 模板 | 1-50ng(质粒) 10ng-1μg(基因组) | SinoBio Super Taq Plus酶 | 0.25μl(1.25U) | ddH2O | 至50μl | *Mg2+终浓度为1.5mM |
常用PCR循环 当扩增片段<3K: 94oC | 1分钟30秒 | 30次 循环 | 94oC,30秒 57oC,30秒 72oC,根据产物长度调整,15秒/1kb | 72oC | 5分钟 | 4oC | 保温 |
当扩增片段≥3K(推荐引物长度≥30bp): 94oC | 20秒 | 30次 循环 | 94oC,5秒 68oC,根据产物长度调整,15秒/1kb | 72oC | 5分钟 | 4oC | 保温 |
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