产品描述: DNA Topoisomerase I催化4种反应: 1)催化负超螺旋DNA的松弛。 2) 在单链环状DNA分子内形成绳结(Knot t ing) 和解开绳结(Unknotting)。 3)催化具有互补碱基序列的环状单链DNA形成双链闭环状DNA分子。 4)2个环状双链DNA分子之中的一个存在DNA链的切口时,发生两个分子的连结反应(Catenation)或者逆反应(Decatenation)。 完整的DNA 拓扑异构酶I(E. coli)全酶是一分子量97 kDa的蛋白。本制品是把topA基因(E. coli)在大肠杆菌中进行表达后,经多次纯化分离而得到的。 使用建议: DNA的结构转换和解析。 | 产品内容: DNA Topoisomerase I(5U/µl) | 10µl | 10× DNA TopoI Reaction Buffer | 1ml |
质量保证: 经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。
单活性定义: 一个单位定义为在25 µl 反应体系,37°C 15分钟条件下,能催化>95% 的0.5 µg pUC19 RF I型(负超螺旋) DNA的解旋所需要的酶量。DNA超螺旋化通过不含EB的琼脂糖凝胶电泳来检测。 反应条件: 1X 反应缓冲液,37°C温育。 热失活: 65°C,20分钟可使40 units的酶失活。 |