产品描述：
本制品是SinoBio Taq经特殊工艺处理后的制品。经处理后的Taq酶在加热至高温前，其聚合酶活性被抑制，从而抑制低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。SinoBio Hot Start Taq在PCR反应最初的DNA变性步骤后已恢复活性，因此无需特殊失活处理，在常规PCR反应条件下即可使用。本制品适用于高特异性PCR反应、Multiplex PCR、高GC含量（>60%），有二级结构等有较强背景的基因组扩增的扩增和大规模基因组扩增检测。 特点： - 简便：无需要专门的高温复性步骤，在PCR第一次升温变性过程中即可完全恢复活性，可在所有正常PCR程序中实现热启动PCR的效果（图例一）。
- 高效：有效减少了杂带及拖带产生，从而实现高特异性的PCR。
- 灵敏：可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段（图例二）。
产品用途：
1）高特异性PCR反应；
2）复杂模板扩增；
3）Multiplex PCR；
4）基因组扩增检测； 使用建议： - 使用本试剂扩增得到的PCR产物3'端有一突出“A”碱基，可直接克隆于T-vector中。
- 当扩增较长片段时，推荐使用SinoBio Hot Start Taq plus，该酶对于较长的DNA片段扩增具有更高的扩增效率及保真度。
图例一） 50µl扩增体系中，以50ng人基因组DNA为模板，SinoBio Hot Start Taq可对特定基因片段（170bp）进行高特异性扩增。 泳道M：DL2000 DNA Marker； | 泳道1、2：Taq酶1.25U； | 泳道3、4： Hot Start Taq酶、1.25U |
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| 产品包装： SinoBio Hot Start Taq（5U/ul） | 50µl | dNTP混合液（各10mM）* | 200μl | 5×Taq Buffer with Mg2+ | 2000μl | *E017-02系列不含dNTP混合液 |
质质量保证：
经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。
活性定义： 在74oC条件下，30分钟内催化10nmol dNTP的 掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单 位。 常用反应体系（50μl）: 5×HSTaq Buffer | 10µl | 上游引物 | 0.2-1.0µM(终浓度) | 下游引物 | 0.2-1.0µM(终浓度) | dNTP(各10mM) | 1.0µl | 模板 | 1-50ng（质粒） | 10ng-1µg(基因组) | Hot Start Taq | 0.25µl（1.25U） | ddH2O | 至50µl | *Mg2+终浓度为2mM |
常用PCR循环 | 当扩增片段<3K： | 94℃ | 1分30秒 | 30次循环： | 94oC，30秒
57℃，30秒 | 72℃，根据产物长度调整，60秒/1kb | 72℃ | 5分钟 | 4℃ | 保温 | | | 当扩增片段≥3K（（推荐引物长度≥30bp）： | 94℃， | 20秒 | 30次循环： | 94℃，5秒 | 68℃，30秒 | 72℃根据产物长度调整，60秒/1kb | 72℃ | 5分钟 | 4℃ | 保温 |
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