产品描述：
本制品是采用SYBR Green嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂。制品中已经将DNA聚合酶、反应用Buffer、dNTP、SYBR Green等试剂预混在一起，是一种2×浓度的Premix Type试剂，进行实验时，PCR反应液的配制十分方便简单。本制品采用SinoBio Hot Start Taq并结合特别配方的反应缓冲液，能有效抑制非特异性反应，提高了反应特异性，能够在更广的范围内进行准确定量。

特点：

使用建议：
保存：原则上-20℃遮光保存。如果持续使用，可在4℃内进行短期保存，但此时也须遮光，建议使用遮光箱或用添附的铝袋进行保存。
使用：使用时请上下颠倒轻轻均匀混合，避免起泡，并经轻微离心后使用。
配置： 反应液的配制、分装请使用新的（ 无污染的）枪头、Microtube等，尽量避免污染。建议反应液体积为25 ～ 50μl。
引物设计：一般为了增加敏感度及扩增效率且抑制非特异性反应，扩增目标序列越短越好。建议设计成200bp以下。另外对GC cluster(特别是3’末端)等，会引起引物二聚体等非特异反应，一般不建议采用，特别是Intercalater Assay受非特异性反应影响较大，更需注意。

第一链cDNA的使用：由于逆转录酶经热处理后仍会对PCR有抑制性影响，故建议将第一链cDNA合成反应液用蒸馏水稀释后再加以使用。

适用的Real Time PCR扩增仪
ABI PRISM7000/7700/7900HT，

7300/7500 Real-Time PCR System，

7500 Fast Real-Time PCR System（Applied Biosystems）

LightCycler（R℃he Diagnostics）

Line-Gene（Bioer，杭州博日）

Smart Cycler® System（Cepheid）

Mx3000P（Stratagene）

其他各种Real Time PCR扩增仪。

1×SYBR Green Realtime Master Mix成份：
25 units/ml SinoBio Hot Start Taq DNA 聚合酶，1×反应缓冲体系 (pH 8.5), dATP, dGTP, dCTP,TTP各200μM, 2mM MgCl₂。

活性定义：
在74℃条件下，30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。

质量保证：
经多次柱纯化，SDS-PAGE检测纯度大于95%；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。

常用反应体系（50μl）:

常用PCR循环
两步法PCR扩增程序（推荐）：

三步法PCR扩增程序（引物TM值较低或其他原因）：