6 mL亲和层析柱工具套装
用于亲和层析法纯化蛋白或其他物质
逗点生物提供的亲和层析空柱专为实验室应用而设计,可小批量纯化蛋白或其他物质,以方便进一步的科学研究和放大试验。
柱管由医疗级聚丙烯注塑而成,具有清洁无毒、不与生物分子结合及低溶解度等特点。
筛板由高纯度的超高分子量聚乙烯烧结而成,并经独特的工艺加工,具有优异的亲水性。亲水性筛板采用了逗点领先的亲水性UHWMPE生产技术,使该筛板能保证使用重力法时的流速为1-2mL/min或1-2滴/秒。同时,与其他厂家的产品相比,该筛板不会由于亲水基团的引入而对蛋白产生吸附。另外该筛板在使用过程中不易形成气泡,气泡会使流速降低,使液体通过基质时不均一。
亲和层析工具套装配备抽提装置、装柱推杆和联接管,方便柱子的装填并和蠕动泵等设备配合使用。
产品组成
针筒型亲和层析柱工具套装
货号 | 描述 | 包装 |
006001 | 亲和层析工具套装,1mL针筒型 每个工具套装包含足够组装10支亲和层析柱的工具。 包括:1mL针筒型空柱10支,筛板20个,下盖10个,上盖10个,0.5米连接管1根,抽提装置2个,装柱推杆1根,操作手册1份。 | 10支/套 |
006002 | 亲和层析工具套装,3 mL针筒型 每个工具套装包含足够组装10支亲和层析柱的工具。 包括:3 mL针筒型空柱10支,筛板20个,下盖10个,上盖10个,0.5米连接管1根,抽提装置2个,装柱推杆1根,操作手册1份。 | 10支/套 |
006003 | 亲和层析工具套装,6mL针筒型 每个工具套装包含足够组装10支亲和层析柱的工具。 包括:6mL针筒型空柱10支,筛板20个,下盖10个,上盖10个,0.5米连接管1根,抽提装置2个,装柱推杆1根,操作手册1份。 | 10支/套 |
006004 | 亲和层析工具套装,12 mL针筒型 每个工具套装包含足够组装10支亲和层析柱的工具。 包括:12 mL针筒型空柱10支,筛板20个,下盖10个, 上盖10个,0.5米连接管1根,抽提装置2个,装柱推杆1根,操作手册1份。 | 10支/套 |
006005 | 亲和层析工具套装,30 mL针筒型 每个工具套装包含足够组装5支亲和层析柱的工具。 包括:30 mL针筒型空柱5支,筛板10个,下盖5个, 上盖5个0.5米连接管1根,抽提装置2个,装柱推杆1根,操作手册1份。 | 5支/套 |
006006 | 亲和层析工具套装,60mL针筒型 每个工具套装包含足够组装 5支亲和层析柱的工具。 包括:60 mL针筒型空柱5支,筛板10个,下盖5个,上盖5个,0.5米连接管1根,抽提装置2个,装柱推杆1根,操作手册1份。 | 5支/套 |
006008 | 亲和层析工具套装,300 mL针筒型 每个工具套装包含足够组装3支亲和层析柱的工具。 包括:30 mL针筒型空柱3支,筛板6个,下盖3个,上盖3个,0.5米连接管1根,抽提装置1个,装柱推杆1根,操作手册1份。 | 3支/套 |
针头型亲和层析柱工具套装
货号 | 描述 | 包装 |
006007 | 亲和层析工具套装,1 mL针头型 每个工具套装包含足够组装10支亲和层析柱的工具。 包括:1 mL针头型空柱(带接头盒压圈)10支,筛板20个, 下盖10个,0.5米连接管1根,注射器10个,抽提装置2个,装柱推杆1根,操作手册1份。 | 10支/套 |
装填方法(以针筒型柱子为例)
1. 筛板的处理
用镊子夹住筛板的一端,轻轻放入蒸馏水或基质保存液中,避免筛板的空隙中留存气泡。另一个方法是把筛板放入装有适量蒸馏水或基质保存液的小烧杯中,在超声波清洗仪中超声数秒排除筛板空隙中的气泡。
2. 基质保存液的填充
盖好下盖,在针筒型柱子内加入基质保存液,用手指轻弹柱壁,排除下盖附近的气泡,继续加入基质保存液,直到充满整个柱管。
3. 下筛板的安装
取一个筛板,放在柱子顶端,用装柱推杆将其推到柱子底部。
4. 基质的装填
用滴管把基质(载体)逐滴加入柱子中,静置片刻让基质沉降。当基质沉降到到合适高度后,小心地加入基质保存液,直到充满整个柱子。
5. 上筛板的安装
取一个筛板,放在柱子顶端,用装柱推杆将其推到基质上端。
注意:若筛板进入柱体后倾斜,需用玻璃小棒轻推筛板上沿,使筛板水平,再改用装柱推杆将其推到基质上端。
6. 密封及保存
盖好上盖,置于4 ℃冰箱保存。
注意:必要时用密封胶带缠绕上、下盖,进一步密封。
亲和层析柱工具套装

使用示例(组氨酸标签蛋白的纯化)
注意:附录中所举例子只是为了帮助更好地理解亲和层析套装的使用,不能作为实验指南。实验流
程请参考基质填料供应商提供的说明书。
0. 缓冲液组成
缓冲液 | 组成 |
缓冲液A | 20 mM***酸缓冲盐,pH 7.4 |
缓冲液B | 20 mM***酸缓冲盐,pH 7.4,含3.4%咪唑 |
缓冲液C | 由缓冲液A和缓冲液C配置而成的梯度缓冲液, 分别含有10、20、50、100和200 mM咪唑 |
1. 亲和层析柱的装填
选用6 mL针筒型亲和层析空柱,以二价镍(Ni2+)螯合琼脂糖凝胶6B FF装柱,柱床体积为1 mL。
2. 平衡
用5-10倍柱体积的缓冲液A平衡,流速为1 mL/min。
3.结合
将约5 mL细胞破碎液(20 mM***酸缓冲盐溶液,pH 7.4,0.5 M NaCl)经0.45μm膜过滤后上样,流速为1mL/min。
4.洗涤
用5-10倍柱体积的缓冲液A洗涤,流速为1 mL/min。
5.洗脱
分别用含10、20、50、100和200 mM咪唑的缓冲液B进行阶段洗脱,流速为1-2 mL/min。收集各阶段洗脱峰。
6.再生
先用10柱体积纯水流洗,再用10柱体积20%乙醇流洗,流速为1 mL/min。将柱子保存于4 ℃冰箱。
7.检测
对收集的馏分,可用SDS-PAGE检测融合蛋白的分子量大小和纯度。
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