1. 适用于各种动物血液 适用于各种动物血液 于各种动物血液及骨髓本系列产品检索：：：：A． 本分离液是敏光型的，在运输和贮藏过程中应在 18℃-25℃避光保存，启封后置 4℃保存避免微生物污染。另外，本品为真空包装，未启封前置于 10℃ 以下易出现白色结晶，影响分离效果。B． 待分离的样本要求新鲜，避免冷冻和冷藏。分离液和所分离样本一定在 20℃水浴箱中复温 20 分钟保证分离液和所分离样本温度在 20℃±2℃时分离效果最好，且所有操作过程一定要在无菌条件下进行。C． 由于各品牌离心机的性能不同，国内南北地区温度环境和四季的差异，可能影响分离效果，用户可以调节离心转数，调节离心的时间，摸索最佳的分离条件（具体分离条件各实验室自定）。D． 最好使用无静电反应的离心管，推荐使用未经过碱处理的玻璃离心管。E． 最优抗凝剂选择：EDTA、枸橼酸、肝素。应注意在血液稀释过程中应去除抗凝剂体积。 F． 分离过程中所用其他试剂如：羟乙已基淀粉 550、全血及组织稀释液、细胞洗涤液及红细胞裂解液等以我公司产品为最优选择，本公司相关系列产品无菌、无病毒、无支原体、低内毒素水平且无细胞毒性，所获得的细胞可保持完好的生物活性和完整的细胞形态。4. .. 应 4. 用适用于从动物血液或骨髓中分离干细胞。5.. . . 产品性能指标pH 7.0-7.5 渗透压 280-340mOsmol/kg 内毒素 ≤0.5...EU/ml无菌 直接接种培养 14 天后培养基澄清 澄明度及不溶性颗粒物 每 50ml 溶液中含 10μm 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 20 粒以下含 25μm 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 5 粒以下6.. . . 贮藏及保存期限 贮藏及保存期限18℃-25℃避光保存，有效期两年。启封后置 4℃保存，有效期一周。 注：：：：若保证无微生物污染，启封后可置 4℃长期保存。但应注意保存温度较低时本分离液易出现白色结晶，影响分离效果。7. .. 实验前准备 7. 实验前准备A． 试剂干细胞分离液、全血及组织稀释液、细胞洗涤液、羟乙已基淀粉 550、胎牛血清B． 器材玻璃离心管、玻璃滴管水平转子离心机、无菌工作台8.. . . 使用方法说明及图例 使用方法说明A.Ⅰ. 取新鲜抗凝血液或脐带血与羟乙已基淀粉 550（Cat#aaa：：：：HES----TBD550）按 1:1 比例混合， 37℃反应 5-10 分钟（5ml 以下样本反应 5 分钟，5ml 以上样本反应 10 分钟）； Ⅱ. 取新鲜抗凝骨髓，加入一份细胞洗涤液（Cat#：2010X1118），混匀后以 400g（约 1500 转/分）离心 5 分钟，弃去上清。沉淀与羟乙已基淀粉 550（Cat#aaa：：：：HES----TBD550）按 1:1 比例混合，37℃反应 5-10 分钟（5ml 以下样本反应 5 分钟，5ml 以上样本反应 10 分钟）； B. 加入为步骤 A 中所得混合液 1/2 体积的全血及组织稀释液（Cat#：2010C1119）混匀 20℃-30℃自然沉降 20-30 分钟，吸取上清备用； C. 向步骤 B 中所得上清液中加入为其一倍以上体积的细胞洗涤液（Cat#：2010X1118）混匀，以 500g（约 1800 转/分）离心 15 分钟（半径 15cm 水平转子），弃去上清保留沉淀细胞； D. 向细胞沉淀中加入全血及组织稀释液（Cat#：2010C1119）调整细胞浓度为 2×1081×109个/ml，小心叠加于细胞分离液之液面上（混合液：分离液=2:1）； E. 以 400g（约 1500 转/分）离心 20 分钟（半径 15cm 水平转子）； 此时，离心管中由上至下分为四层：第一层；为稀释液层。第二层；为环状乳白色含所需干细胞层。第三层；为透明分离液层。第四层；为极少数红细胞层。收集第二层细胞放入约为其 5-10 倍体积的细胞洗涤液（Cat#：2010X1118）中，充分混匀后以 500g（约 1800 转/分）离心 15 分钟。沉淀经反复洗涤 2 次既得所需干细胞。 F. 为获得纯度更高的干细胞，在步骤 E 中离心完成后可吸取第二层干细胞层再与羟乙已基淀粉 550（Cat#aaa：：：：HES----TBD550）按 1:1 比例混匀，20℃-30℃自然沉降 20-30 分钟，收集上清。只能用于科学研究，不能用于临床检测血小板 100-300×109/L（10 万-30 万个/mm3) 名称                                                         占白细胞总数百分比嗜中性粒细胞                                                 30%-70% 嗜酸性粒细胞                                                 0.5%-5% 嗜碱性粒细胞                                                0%-1% 淋巴细胞                                                    20%-40% 白细胞分类计数单核细胞                                                    3%-8% 干细胞                                                    约占外周血细胞数量3%