货号：P2060

规格：1000U（200μL）

产品简介：

rTEV蛋白酶(重组型)是经过基因工程改造后的重组蛋白酶，该酶特异性识Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe- Gln-Gly七氨基酸序列。rTEV蛋白酶与肠激酶U(EK)、Thrombin、FactorXa、SUMO等蛋白酶相比，具有高活性、高特异性的双重特点，rTEV蛋白酶因具高剪切活性和特异性，已成为融合蛋白表达后去除融合tag的首选蛋白酶。该酶经6×His标签纯化而得(含组胺酸标签)，纯度达99％，剪切反应完毕后可通过His标签纯化树脂Ni-NTA Resin(Cat.No. P2010)去除。

产品内容：

试剂名称	规    格	保存温度
rTEV蛋白酶（5U/μL）	200ul	-80℃
250×rTEV Protease Buffer	1mL	-20℃
说明书	1份

保存条件：

rTEV蛋白酶-80℃长期保存，可存储2年；首次使用后可置于-20℃保存，可储存6个月，避免反复冻融。250×rTEV Protease Buffer可置于-20℃保存。

酶活定义：

在1×rTEV Protease Buffer中，30℃反应1h，剪切>85%的3 μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。

使用方法说明：

1. 推荐使用溶液：50 mM NaH₂PO₄, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM DTT, 10%甘油，pH 8.0 buffer中进行剪切。

2. 250×rTEV Protease Buffer：250mM EDTA, 250 mM DTT, PH 8.0

3. rTEV蛋白酶与需要酶切的目的蛋白比例：1：100

4. 酶切体系：

融合蛋白        1000 μg

250×rTEV Protease Buffer       4μL

rTEV蛋白酶   2μL

定容至 1000μL

定容缓冲液：50 mM NaH₂PO₄, 150mM NaCl

5. 酶切条件：在16℃酶切6hr。用户可以根据自己研究的目的蛋白进行摸索酶切条件，可适当加大酶量或延长酶切时间。

6. 可取少量样本进行SDS-PAGE分析，若要去除酶切后体系中的rTEV蛋白酶，可用His标签纯化树脂亲和层析。