猪瘟病毒(CSFV)核酸扩增检测试剂盒

 

【名称】                                                                    

中文名：猪瘟病毒(CSFV)核酸扩增检测试剂盒

英文名：Classical swine fever virus Polymerase Chain Reaction (PCR) Diagnostic Kit

 

【目的】

本试剂盒适用于检测猪肺、淋巴结、血清等标本中猪瘟病毒(CSFV)mRNA，适用于猪瘟病毒感染的辅助诊断。其检测结果仅供参考。

 

【原理】

本试剂盒用一对猪瘟病毒特异性引物，用一步法PCR对猪瘟病毒RNA进行体外扩增，产物经凝胶电泳，溴化乙锭(EB)染色，紫外灯观察，从而达到快速检测之目的。

 

【试剂组成】

名      称	数      量	规      格
RNA提取液A	1   瓶	10ml/瓶
RNA提取液B	1   瓶	10ml/瓶
逆转录酶系	1   管	40μl/管
Taq酶系	1   管	40μl/管
CSFV PCR MIX	1   管	800μl/管
CSFV阳性质控品	1   管	100μl/管
阴性质控品	1   管	250μl/管
DEPC 水	1   管	2000μl/管

【储存条件】打开包装后RNA提取液A、RNA提取液B  4℃保存；其余-20℃保存，避免反复冻融。自备75%乙醇。

【试剂规格及有效期】40头份/盒，有效期6个月。

 

【标本采集】

1. 适用标本类型：猪肺、淋巴结、血清或其他组织等

2. 标本采集

猪肺、淋巴结：无菌条件下取猪肺、淋巴结或其他组织等100mg左右，置入1.5ml洁净EP管，立即送检。

血清： 用一次性无菌注射器抽取受检猪耳静脉或者前腔静脉静脉血2-5ml，静置斜放待血清析出， 1,0000rpm离心3分钟，可取上清立即用于测试；或吸取上部血清(约200µl)转入无菌1.5ml Eppendoff管，保存待检。

 

【保存和运输】上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃。但不能超过6个月，标本运送应采用0℃冰壶。

 

【适用仪器】取得资格认证的定性PCR仪。

 

【使用方法】

1．RNA提取

1.1样品处理

固体组织：取0.5g左右组织用玻璃匀浆器匀浆或剪刀剪碎，加入1.5ml生理盐水继续研磨，待匀浆后转至1.5ml的EP管中，10000rpm离心2min。取上清100μl于1.5ml的EP管中，加入200μl RNA提取液A充分震荡，静置3min。

血清或病毒液：取100μl血清加入200μl RNA提取液A充分震荡，静置3min。