人全血单个核细胞分离液说明书P9010200ml室温避光储存，有效期至少2 年。本品为带有乳光或微乳光的灭菌水溶液。主要成分是Ficoll 400与泛影酸葡甲胺。适用于从各种动物血液中分离单个核细胞，在医疗和医学生物学研究中广泛应用。注：因不同种属不同比重分离液的细胞离散系数及细胞带电不同，所以用户在定制分离液时应提供所需分离液的比重、动物的种属及被分离细胞的名称。A、 取新鲜抗凝血1ml，与全血及组织稀释液1:1 混匀后，小心加于2ml细胞分离液之液面上；B、 以400g（约1500转/分，半径15cm水平转子）离心15分钟，此时离心管中由上至下细胞分四层。第一层：为血浆层。第二层：为环状乳白色单个核细胞层。第三层：为透明分离液层。第四层：为红细胞层。收集第二层细胞放入含细胞洗涤液4-5ml的试管中，充分混匀后，以500g（约1800转/分）离心20分钟。弃去上清留沉淀细胞重新悬起。沉淀经2次洗涤后即得所需单个核细胞。注： 提取率约为80%。A．本分离液要求血液为新鲜抗凝血，避免冷冻和冷藏；在收集血液和分离过程中，应注意无菌操作，避免微生物污染。B．本实验要求，在正常大气压下，分离液、分离样本以及分离环境温度为20℃±2℃。分离液在低温时呈较高密度，在高温时呈较低密度。细胞分离液从冰箱取出后，不可立即使用，操作前可将样本和分离液置于20℃水浴中复温20分钟以保证分离温度。C．由于各品牌离心机的性能不同，国内南北地区温度环境和四季的差异，可能影响分离效果，用户可以调节离心转数和离心时间，摸索最佳的分离条件（具体分离条件各实验室自定）。D．最好使用无静电反应的离心管，推荐使用未经过碱处理的玻璃离心管。SolarbioE．最优抗凝剂选择：EDTA、枸橼酸、肝素。应注意在血液稀释过程中应去除抗凝剂体积。pH 7.0-7.5渗透压 280-340mOsmol/kg内毒素 ≤0.5EU/ml无菌 直接接种培养14 天后培养基澄清澄明度及不溶性颗粒物 每50ml 溶液中含10μm 以上的不溶性微粒20 粒以下，含25μm 以上的不溶性微粒5 粒以下本分离液是敏光型的，应在18℃-25℃避光保存，有效期两年。启封后置4℃保存，若保证无微生物污染， 4℃可长期保存。保存温度较低（10℃以下）时本分离液易出现白色结晶，影响分离效果。