Protein A/G, Recomb., {E. coli}
型号:null    产品货号: 539228-1MG
价格:请致电:010-57128832,18610462672
品牌: 德国

Protein A/G, Recomb., {E. coli}

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V1.1

 

MycAwayTM-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit

 

一步法快速支原体检测试剂盒
产品信息
产品名称
产品编号
规格
储存
价格(元)
MycAwayTM -Color One-Step Mycoplasma Detection Kit
一步法快速支原体检测试剂盒
40611ES25
25T
-20
467
40611ES60
100T
-20
1537
产品描述
MycAwayTM -Color One-Step Mycoplasma Detection Kit是利用Yeasen独特的等温扩增技术,专门针对细胞培养液中支原体污染的快速检测产品。较以往支原体检测产品,本试剂盒使用更为简便,只需吸取1μl疑似支原体污染的细胞培养上清加入反应体系中,61°C孵育45分钟即可,其主要原理是若细胞培养物被支原体污染,支原体DNA的保守序列会被大量、快速地扩增,使反应液由蓝紫色变成天蓝色,结果肉眼可辨,无需电泳。
翊圣MycAwayTM -Color One-Step Mycoplasma Detection Kit可以检测多种支原体,包括细胞培养过程中常见的8种支原体。传统巢式PCR支原体法检测法易受细胞培养上清中抑制物的影响,产生假阴性结果;反应后需开盖电泳检测,增加污染导致的假阳性风险。一步法支原体检测试剂盒完全没有上述缺点,且其检测灵敏度、准确性远远高于PCR法。
产品组分
组分编号
组分名称
产品编号/规格
40611ES25/25T
40611ES60/100T
40611-A
MycAwayTM-Color A
600 μl
600 μl×4
40611-B
MycAwayTM-Color B
25 μl
25 μl×4
40611-C                            
Positive Control
10 μl
10 μl×4
40611-D
矿物油
500 μl
500 μl×4
运输与保存方法
冰袋运输。
-20避光保存,保质期18个月。若较长时间不用,请注意避光保存。
注意事项
1)使用本试剂前请仔细阅读说明书。
2)整个实验,应规范操作,包括反应体系的配制、样本处理及加样。
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 支原体待检样本准备
贴壁细胞:直接吸取上清。建议在细胞传代或换液3天以上,且汇合度达到90%左右时取样,此时上清中支原体含量较高,便于检出。
悬浮细胞500 g离心5min后,吸取上清。建议在细胞传代或换液3天以上时取样,此时支原体含量较高,便于检出。
2. 反应体系
MycAwayTM-Color-20 °C取出,溶解后颠倒混匀,瞬时离心确保所有液体落到管底。根据待检测样品量,在200μl配制如下体系(通常一次实验设置一个阴性对照、一个阳性对照):
 
单次反应体积 (μl)
 
总体积 (μl)
MycAwayTM -Color A
24
×样品数 × 1.1*
_____
MycAwayTM-Color B
1
_____
*】:移液器存在误差,配制时请多出10%为保证分装后每管的量。
3. 加样
阴性对照:第一支反应管中不加入任何样品,作为阴性对照;
待测样品:向其余反应管中加入1μl待测培养上清;
阳性对照:向最后一个反应管中加入1μl Positive Control,作为阳性对照。如果反应是在水浴锅中进行,则每管加入20μl矿物油,以防止液体蒸发导致结果的误差。如果反应是在PCR仪中进行,不需要加矿物油。
【注】:实验室中支原体污染十分常见,鉴于本试剂盒反应灵敏,建议用户在超净台中配制反应组分,以免出现假阳性结果。
4. 反应条件
将水浴锅或PCR仪设置为61°C,放入反应管,恒温孵育45 min
【注】:本试剂盒所用酶对温度非常敏感,强烈建议使用PCR仪操作;如用水浴锅,应先加热使其达到规定温度后再反应。温差超过2°C,将导致扩增效率降低,使阳性反应无法在说明书规定的时间内达到典型的天蓝色。
5. 结果判断
61°C反应45min后,立刻取出反应管,放于室温。于光线良好的环境中观察反应结果(建议以白纸为背景)。如果反应液仍为蓝紫色,则判定为阴性;若反应液为天蓝色,则判定为阳性。颜色如下图所示,也可以阴性反应管与阳性反应管作对照。
【注】:当支原体污染较少时,45min后反应管的颜色可能介于阴性与阳性之间,此时反应时间可延长15min,但总时间不建议超过60min,否则可能产生假阳性。反应管不可开盖,因为产生的气溶胶可能会产生交叉污染。
阴性阳性
更多支原体检测、去除、预防产品详见:http://yeasen013.bjsx32.host.35.com/Productfeature/1660.htm
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