人胃上皮细胞
英文名称: Human Gastric Smooth Muscle Cells
型号:null    产品货号: 2820
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品牌: 美国

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       美国ScienCell研究实验室(www.sciencellonline.com)成立于1999年,公司总部位于美国加州的圣地亚哥。主要致力于实验室科研用原代细胞、原代细胞专用培养基、原代细胞无血清培养基、干细胞、干细胞培养基、干细胞无血清培养基的研究和开发,在全球拥有众多客户。在国内销售8年来,很多老师应用其产品发表了高质量的SCI文章,且有着极高的文献引用率。凭借着严格的质控和优秀的产品品质,深受广大科研工作者的信赖。
         ScienCell研究实验室生产的原代细胞、原代细胞专用培养基都经过了严格的质量控制,细胞纯度可达98%。其中包括21种人体正常细胞系统,90多种不同细胞类型。大多数细胞在全球唯有ScienCell实验室能够成功分离,产品质量过硬。确保了实验结果的重复性和连贯性。
 

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产品:人胃上皮细胞

 

货号:2820

 

 

 

                 

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原代细胞(纯度可达98%。其中包括21种人体正常细胞系统,90多种不同细胞类型。大多数细胞在全球唯有ScienCell实验室能够成功分离。)
原代细胞专用培养基
无血清培养
干细胞无血清培养基(骨髓间充质干细胞、胚胎干细胞)
原代细胞转染试剂盒等。

        复蒙基因|FMGBio(www.fmgbio.com/   www.sciencell-sh.com/   )成立于2005年, 是专业从事牛血清生产、销售高端的原代细胞类科研产品。这些产品从根本上提高了全球生命医学研究、人类重要疾病药物研发、新药研发的成功率。近几年的新药研发成功率在逐年下降,其根本原因之一就是传统的药物筛选系统是建立在只具有30-40%人类基因群的一系列细胞株上。这样一个有“缺陷型”药物筛选系统所产生的药物用于人体上就会出现许多致命的弱点和不完整性。新一代药物筛选系统是含有一系列近乎完整的人类基因群的原代细胞株。而利用这些原代细胞株所甄别和筛选出来的候选药物,其诊治人类疾病的成功几率将大大增加。这样不但大大节省了新药的开发成本,而且将极大地提高人类的健康质量。

        复蒙基因|FMGBio现有的产品:美国Sciencell(原代细胞、原代细胞专用培养基、无血清培养基)、3D Bioteck(三维细胞培养支架)、年产1000万毫升的内蒙古牛血清生产基地等。


       复蒙基因|FMGBioPI团队已经发展到专职PI 20人,联席PI 312人,其中大多数拥有海外背景。截止到20093月,以PI或联席PI为第一作者发表SCI 论文1682 篇(总IF 值为5721.82,其中影响因子IF>5.0 的论文216 篇,IF>10.0论文32 篇)。

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N-US" style="font-size: 9pt;">ELISAPCR法等。

GMyc-PCR支原体检测试剂盒主要采用PCR方法对各种生物材料(如细胞培养物、实验动物分泌物、动物血清等)支原体感染的检测。它综合了几个优势:灵敏、特异、快速并且可以用直接用细胞培养上清液检测。本制品通过PCR方法检测培养细胞等生物材料中的支原体,所用引物为根据支原体16S-23S rRNA序列保守区域设计,只特异性扩增支原体DNA,检出灵敏度与特异性均较高。PCR扩增及电泳分析只需数个小时,操作方便简单。

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

40601ES10

40601ES20

40601-A

GMyc-1st PCR Mix

250µl

2×250µl

40601-B

GMyc-2nd PCR Mix

250µl

2×250µl

40601-C

Positive Control Template12

20µl

20µl

【注1】:长期不用时,可-80冷冻保存。

【注2】:PCR反应极其灵敏,为防止假阳性,加样时,最后加阳性对照。

运输与保存方法

冰袋运输。-20保存。

实验流程

PCR反应为巢式PCR,第一轮PCR结束后,取其反应产物为第二轮PCR模板。根据两轮PCR产物电泳条带之有无及片


段大小来分析结果。贴壁细胞培养3-6天后,直接取其上清液进行PCR反应。为排除细胞培养基抑制PCR反应,阳性对照中需加入等量的细胞上清液。悬浮细胞不能作为样品直接检测,会干扰PCR反应,需提取DNA并进行PCR

第一轮PCR

1. 充分融解GMyc-1st PCR Mix,按下列表格配制反应液:

试剂

实验组

阳性对照

阴性对照

GMyc-1st PCR Mix

25µl

25µl

25µl

样品

4µl

4µl

 

ddH2O

21µl

20µl

25µl

Positive Control Template1

 

1µl

 

【注】:为防止Positive Control Template污染,请将实验组和阴性对照组加完以后,最后再将Positive Control Template加入阳性对照组。

 

2. 按下列条件进行PCR反应:

        

 

第二轮PCR

1.        充分融解PCR Mix,按下列表格配制反应液:

试剂

实验组

阳性对照

阴性对照

GMyc-2nd PCR Mix

25µl

25µl

25µl

ddH2O

24µl

24µl

24µl

1st PCR反应液

1µl

1µl

1µl

2. 按下列条件进行PCR反应:

   

反应结束后,取10 μl PCR反应液(不需要加loading buffer)直接进行1.5%琼脂糖凝胶电泳,确认PCR扩增产物。

推荐使用频率

新细胞进入实验室

必检

液氮保存前

必检

定期常规

每月检测一次

发现污染后

每周检测一次

发现细胞异常

随时检测


注意事项

1)使用本试剂前请仔细阅读本说明书全文。

2)操作时应尽量少说话,因口腔中也含有支原体,可能引起样品污染,而造成假阳性;整个检测过程中,反应体系的配制、样本处理及加样、PCR扩增应分区域进行,以避免交叉污染。

3)实验时,试剂盒组分中的试剂使用前应充分融化并混匀(混匀时禁止激烈振荡,只需要进行上下倒置多次进行混匀)。

4)反应管中加好所有的试剂后,应尽快上PCR仪进行扩增,以免形成过多的二聚体。

5)细胞培养物中含有青霉素和链霉素等抗生物素不会影响本品的检测结果。如果用户需要进一步提高检测灵敏度,建议细胞在不含青霉素和链霉链等抗生素中进行培养2-3天后送样检测。

6)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

附录

各种支原体扩增片段大小

Species

第一轮PCR

第二轮PCR

M. hyopneumoniae 

681

237

M. neurolyticum

501

196

M. fermentans

491

195

M. pulmonis

477

189

M. hyorhinis

448

211

M. orale 

423

179

M. capricolum  

415

179

M. arthritidis  

408

157

M. salivarium   

403

151

M. hominis   

370,369

147,148

M. arginini 

369

145

U. urealyticum

482,481

154

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