一、 杂交瘤细胞无血清培养基 产品用途

1.    用于各种杂交瘤细胞的培养，以获取特定的单克隆抗体。

2.    用于SP2/0细胞的传代培养。

二、 杂交瘤细胞无血清培养基 产品原理

杂交瘤细胞是将免疫的小鼠脾淋巴细胞（B细胞）与小鼠骨髓瘤细胞融合在一起，该细胞既具备细胞能够产生特异性抗体的特性，又具备肿瘤细胞能够无限传代（永生性）的特点。因此通过杂交瘤细胞的不断传代，就会得到所需种类的单克隆抗体。

 

三、杂交瘤细胞无血清培养基 产品规格

 NC0301，杂交瘤细胞无血清培养基，1000ml/瓶，2-8℃保存，有效期12个月。

 
四、 生产单克隆抗体细胞所需的培养基

生产应用所需的天然单克隆抗体，主要是通过动物细胞的大规模培养获得。

培养细胞使用的培养基主要有两种：

1.血清培养基（1640培养基+10%-20%血清）。

这种形式为目前国内90%以上的客户所应用。由于血清中蛋白含量很高（超过>20%以上），且蛋白种类很多（几十种），所以给后期的单克隆抗体纯化带来了更多的操作工艺环节与更高的纯化费用。另外由于血清为天然产品，品质受限于不同个体的牛，所以血清批间差大的问题众所周知，无法排除。给生产企业带来了很大的困扰。

2.应用杂交瘤细胞无血清培养基。

杂交瘤细胞无血清培养基，是专门为杂交瘤细胞生长所定制的化学成分明确、使用中不需添加血清的培养基。该培养基用白蛋白第五组分 (BSA)  、转铁蛋白等蛋白组分，替代了血清，达到了培养杂交瘤细胞的目的。由于培养基的化学成分明确，没有添加血清，因此，对单抗生产企业而言，极大简化了后期蛋白纯化的环节，极大降低了后期昂贵的蛋白纯化耗材的消耗。是目前国外生产单抗的主要方式。

五、 杂交瘤细胞无血清培养基  产品性能

1.  无血清，低蛋白。培养过程不需添加血清，后期抗体纯化更便利。

传统上，对于小规模获取单克隆抗体，多采用注射小鼠取腹水的形式。一方面这种方式会给实验动物带来极大的痛苦，在欧美等国家已被严格限制使用。另一方面，该种方式获得的单克隆抗体，由于是在动物体内产品，因此会带来其他非目的抗体及难以避免的宿主病毒。

杂交瘤细胞无血清培养基，化学成分明确、使用中不需添加血清的培养基，极大简化了后期蛋白纯化的环节。

 2.  支持高密度培养，最大可支持密度9.86x10⁶cell/ml，比1640+10%血清形式高出37%。

细胞倍增时间	YOCON无血清培养基	1640培养基+10%血清	G*无血清培养基
单位：小时	17.6	20	17.7

3.  单克隆抗体表达量高。

 

目的条带：50kDa
由凝胶电泳结果可清晰看出，YOCON无血清细胞培养基与1640+10%血清培养基，单克隆抗体产量相当。
相比G^*无血清培养基产品，抗体产量稍高。

4.  无需细胞驯化，直接转入无血清培养基中即可培养。

六、常见问题汇总

1、复苏细胞时，离心去除冻存液，更有利于细胞后期生长

2、最佳接种密度1-3x10⁵/ml，极限能力，不低于3x10⁴cells/mL.

3、达到最大细胞浓度时，添加抗增剂，提高抗体产量

4、细胞直接适应无血清培养基，无需驯化，四天可达到倍增峰值

 

七、杂交瘤细胞无血清培养基  产品质控指标

 PH值：7.0-7.4

 渗透压：270-350 mOsm/Kg

 无菌：霉菌、细菌不得检出

 内毒素：小于5EU/mL

 装量：1000ml/瓶

 外观:橘红色澄清液体

 保存温度：2-8℃，避光保存

八、订货信息

产品货号	产品名称	产品用途	保存与效期
NC0301	杂交瘤细胞无血清培养基	用于杂交瘤细胞的无血清培养， 无需驯化	2-8℃保存,效期12个月