货号：C8950

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产品说明：

CAS：148504-34-1

中文名：3-O-乙酰胺-2,7-二( 羧乙基)-4 或5- 羧基荧光素,二乙酰甲酯

英文名：3,6-Di(O-acetyl)-4,5-bis[N,N-bis(carboxymethyl)aminomethyl]fluorescein, tetraacetoxymethyl ester

别名：钙黄绿素乙酰甲酯

结构式：

分子式：C46H46N2O23

分子量：994.86

性质：

1. 外观：白色或浅黄色晶体

2. 纯度：≥90% （HPLC）

3. 产品描述：

Calcein, AM 是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪

切形成Calcein，从而被滞留在细胞内，发出强绿色荧光。与其它同类试剂（如 BCECF, AM 和CFDA）相比，

Calcein, AM 的细胞毒性很低。Calcein 的激发和发射波长分别为 490 nm 和515 nm。

Calcein, AM 仅对活细胞染色。作为核染色染料的PI 不能穿过活细胞的细胞膜，它穿过死细胞膜的无序区

域而到达细胞核，并嵌入细胞的 DNA 双螺旋从而产生红色荧光（激发：535 nm，发射：617 nm），因此 PI 仅

对死细胞染色。由于 Calcein 和PI-DNA 都可被490 nm 激发，因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。

用545 nm 激发，仅可观察到死细胞。根据以上特点，Calcein, AM 和PI 经常被结合用来作为活细胞和死细胞

的双重染色。

由于不同细胞系的最佳染色条件不同，我们建议个别确定Calcein, AM 和PI 的合适浓度。

操作说明：

（1）用DMSO 制备1 mM 的Calcein, AM 溶液，并用PBS 将其稀释制成1～50μM 的Calcein, AM 溶液①。

（2）将1/10 细胞培养基体积的Calcein, AM 溶液加入到细胞培养基中②。

（3）在37℃培养细胞15～30 分钟。

（4）用PBS 或适当的缓冲液洗涤细胞两次。

（5）用490 nm 激发波长，515 nm 发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。

注：①如果Calcein, AM 很难进入细胞，可以使用表面活性剂，如Pluronic F127 。

② 也可以用1/10 浓度的Calcein, AM 溶液代替培养基。

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