吖***盐和相关化合物已被证明是非常有优势的化学发光标记物，稳定性，活性和敏感性超过了那些***性同位素。吖***酯（试剂盒所提供）能与任何含有氨基的蛋白发生反应，在碱性条件下，NHS将会离去，吖***酯将会以一个稳定的酰胺键与蛋白质结合形成吖***化合物。反应完成后，多余的吖***盐通过脱盐柱除去。在存在碱性过氧化氢，吖***标记的蛋白不需要酶催化可自行发光。加入激发试剂后，体系立即释放光子，可以用430nm标准光度计检测。这个发光过程是十分短暂（整个过程的发生小于2秒）。触发方案必须增加内部光度计和光子探测器。蛋白质，多肽，抗体，核酸都可以用吖***标记。标记化合物在碱性过氧化氢的激发下快速发光，通过收集光子可以检测到标记化合物。