Hoechst 33258
产品信息
产品编号 | 产品名称 | 规格 | 外观 | 储存 | 价格(元) |
40729ES10 | Hoechst 33258 | 10 mg | 黄色粉末 | -20℃干燥避光保存 | 180.00 |
40729ES76 | Hoechst 33258 | 500 mg | 黄色粉末 | -20℃干燥避光保存 | 3189.00 |
40729ES80 | Hoechst 33258 | 1 g | 黄色粉末 | -20℃干燥避光保存 | 5310.00 |
产品描述
Hoechst 33258 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,它在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光,对细胞的毒性较低。Hoechst 33258 常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测,也可以用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。
用于细胞核染色时,推荐的Hoechst 33258工作浓度为0.5-10 μg/ml。
产品性质
中文名称(Chinese Synonym) | 二***甲亚胺, 三氯化氢 2-(4-羟基***基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5-二-1H-***并咪唑 |
英文名称(English Synonym) | 2’-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole, Trihydrochloride;bisBenzimide H 33258; HOE 33258 |
分子式(Molecular Formula) | C25H24N6O·3HCl |
分子量(Molecular Weight) | 533.88 |
CAS号(CAS NO.) | 23491-45-4 |
荧光光谱(Fluorescence Spectral) | Hoechest 33258的Ex/Em=346/460; Hoechest 33258-核酸的 Ex/Em=350/460; 荧光可用氙气灯,泵弧灯或者UV激光激发;可用DAPI滤光器、蓝色GFP滤光器、Alexa Fluor 350滤光器等检测。 |
纯度(Purity) | ≥95%(HPLC) |
结构(Structure) | |
运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。-20℃干燥避光保存,有效期2年。
配制母液
Hoechst 33258溶于水,溶解度可达10 mg/ml。因此可用无菌超纯水配制成1-5 mg/ml的储存液于4℃避光保存。使用时用PBS或者其他合适缓冲液将其稀释成0.5-10 μg/ml工作液。
【注】:Hoechst 33258溶于PBS或者其他缓冲液时会有沉淀产生,因此不能用上述缓冲液进行储存液的配制。
注意事项
1)Hoechst 33258 对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
2)荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3)为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 用PBS或合适的缓冲液制备0.5-10 μg/ml Hoechst 33258染色液。
2. 固定的细胞或组织染色:
a)对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst33258染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的Hoechst 33258染色。
b)对于贴壁细胞或组织切片:加入适量Hoechst 33258染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。
c)吸除Hoechst 33258染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
d)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350 nm,发射波长460 nm。
3. 活细胞或组织染色:
a)细胞培养物中加入适量Hoechst 33258染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1 ml染色液,对于96孔板一个孔需加入100 μl染色液。
b)在 37℃培养细胞 10~20分钟。
c)用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
d)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350 nm,发射波长460 nm。
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