T7 RiboMAX™ Express RNAi System

T7 RiboMAXTM Express RNAi System (a,b,c) (T7 RiboMAXTMExpress RNA干扰系统) 是一种体外转录系统，为短时间内产生毫克级的双链RNA(dsRNA)而设计。产生的dsRNA 中不含蛋白和其它成分的污染，适合于哺乳动物和非哺乳动物系统的RNA干扰(RNAi)研究。T7 RiboMAXTM Express RNAi System可用于合成哺乳动物系统实验中的21bp的短干扰RNAs(siRNAs)。体外合成的siRNAs已被证明能够与化学合成的siRNAs一样有效，均可在哺乳动物细胞中诱导RNA干扰(1,2)。

此外, T7 RiboMAXTM Express RNAi System还可合成将近200bp或更长的dsRNA分子，可被应用于非哺乳动物系统。两条互补的RNA链是以DNA为模板来合成的(模板可以是质粒或PCR产物)。产生的RNA链在转录反应后退火形成dsRNA。反应中残存的单链RNA和DNA模板会以核酸酶消化去除。然后以异丙醇沉淀来纯化dsRNA ，得到的dsRNA可被用于选择进行RNAi实验的生物体。

siRNA Target Designer 程序(www.promega.com/siRNADesigner/)可用来为使用Promega RNA干扰系统设计寡核苷酸序列。该程序对输入的DNA或RNA序列设计符合siRNA要求的区域进行分析。能够沉默这些序列的siRNAs将会与选定的试剂盒所要求的寡核苷酸序列一同显示出来。

特点

  •  节省时间: T7 RiboMAXTM Express RNAi System 可在30分钟内产生毫克级RNA。

  •  将移液的误差减至最低: 4种rNTPs和2X 转录缓冲液已经混合，将移液误差和组装反应组分的时间减到最小。

应用

  •  为研究哺乳动物RNA干扰合成siRNA。

  •  为研究非哺乳动物RNA干扰合成大量的长dsRNA。

操作手册 Technical Bulltetin   TB316

参考文献

1. Yu,J.-H.et al.(2002)Proc.Natl.Acad.Sci.USA99,6047-52.

2. Donze,O.and Picard,D.(2002)Nucl.Acid Res.20,E46.

技术资料

Cell Notes  CN007

Promega Notes  PN083,PN084,PN085,PN086,PN090

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(a) U.S. Pat. No. 5,552,302, Australian Pat. No. 646803 and other patents.

(b) U.S. Pat. Nos. 4,966,964, 5,019,556 and 5,266,687, Australian Pat. Nos. 616881 and641261 and other pending and issued patents, which claim vectors encoding a portion ofhuman placental ribonuclease inhibitor, are exclusively licensed to Promega Corporation.

(c) This product is covered under license from Carnegie Institution of Washington under U.S.Pat. No. 6,506,559, Australian Pat. No. 743798 and other patents pending. Commercial useof this product may require a separate license from Carnegie.