mbchemBrand,null 产品货号： M3040Item#, Hoechst 33342/PI双染色试剂盒<br>英文名称： Hoechst 33342 Cell Staining Kit

货号品名规格售价
M3040-1 Hoechst 33342 Cell Staining Kit 100 assays 280
M3040-2 Hoechst 33342 Cell Staining Kit 250 assays 400
M3040-3 Hoechst 33342 Cell Staining Kit 500assays 700

本试剂盒提供了两种即用型的核酸染料：Hoechst 33342和***化丙***(Propidine Iodide, PI)。

Hoechst 33342，也称bisBenzimide H 33342或HOE 33342。分子式为C27H28N6O·3HCl·3H₂O，分子量为615.99，CAS Number 23491-52-3。

Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。

Hoechst 33342染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33342也常用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。

Hoechst 33342的最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm；Hoechst 33342和双链DNA结合后，最大激发波长为350nm，最大发射波长为461nm。

Hoechst 33342溶于水，溶解度可达20mg/ml。

    ***化丙***(Propidine Iodide, PI，当结合DNA后，最大激发波长和最大发射波长约为535/617 nm)是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但在凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI够透过细胞膜而使细胞核染红。

Hoechst 33342与DNA结合后，凋亡细胞中的凝聚染色质会比正常细胞中的染色质染色更深、更加明亮。PI只能渗透进入死亡细胞，两种染料同时使用，通过荧光显微镜检测或者流式细胞仪检测就可以区分出正常细胞，凋亡细胞和死亡细胞。

产品特点
l 操作简单：简单快速的实验流程；
l 快速便捷：20分钟内可以完成实验；
l 通用性好：可直接使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测；
l 高性价比。

产品组成
n Hoechst 33342染色液 500ul
n PI染色液    500ul
n 10×染色buffer 10ml

试剂盒的试剂含量足够进行100次染色实验。

注意：
1、***化丙***和Hoechst 33342有毒，应小心保存和使用，注意个人保护。
2、Hoechst 33342/PI是光敏物质，请注意避光保存和使用。
3、旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

储存条件
试剂盒所有组分-20℃避光保存.

使用方法
1、染色缓冲液的配制：
a)   根据样品数按下列比例配制染色缓冲液。取100μL染色buffer加900μL无菌去离子水稀释，混匀即成染色缓冲液。
2、收集样本细胞，细胞数量在10×10⁵个以内。
3、用PBS洗涤细胞两次。
4、用500μL-1ml 染色缓冲液将细胞重悬。
5、加入5ul Hoechst 33342染色液。
6、轻轻混匀后室温避光孵育10-15分钟。
7、用PBS洗涤细胞一次。

8、用500μL-1ml 染色缓冲液将细胞重悬。加入5ul PI染色液。

9、轻轻混匀后室温避光孵育10-15分钟。

10、用PBS洗涤细胞一次。

11、用流式细胞仪或荧光显微镜检测结果。Hoechst33342的最大激发波长为350nm，

最大发射波长为460nm，PI的最大激发和最大发射波长分别为488nm和615nm。

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