BCA蛋白浓度测定试剂盒货号：PC0020规格：500微孔(500T)保质期：有效期1年。产品内容：包装（500微孔) 保存BCA 试剂 100ml 室温Cu 试剂 3ml 室温PBS 稀释液 30ml 室温BSA 蛋白标准 (5mg/ml BSA) 1ml -20℃产品简介：碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+， Cu+与BCA 试剂形成紫蓝色的络合物，测定其在562nm 处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS，Triton X-100，Tween 不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA，EGTA)、还原剂（DTT，***）和脂类的影响。实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高，可试用Bradford 蛋白浓度测定试剂盒。操作说明：一. 微孔酶标仪法1. 配制工作液：根据标准品和样品数量，按50 体积BCA 试剂加1 体积Cu 试剂（50:1）配制成BCA工作液，充分混匀(混合时可能会有浑浊，但混匀后就会消失)。BCA 工作液室温24 小时内稳定。2. 稀释标准品：取10 微升BSA 标准品用PBS 稀释至100 微升（样品一般可用PBS 稀释），使终浓度为0.5mg/ml。将标准品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20 微升加到96 孔板的蛋白标准品孔中，加PBS 补足至20 微升。3. 将样品作适当稀释（最好多做几个梯度，如作2 倍、4 倍、8 倍稀释），加20 微升到96 孔板的样品孔中。由于移液器在取小量样品时误差偏大，标准线前面的点可能不很准确，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2 后。4. 各孔加入200 微升BCA 工作液，37℃放置15-30 分钟。用酶标仪测定A562nm，根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时，应注意防止因水分蒸发影响检测结果。二. 分光光度计法如没有酶标仪，可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。步骤如下：1. 配制工作液: 根据标准品和样品数量，按50 体积BCA 试剂加1 体积Cu 试剂（50:1）配制成BCA工作液，充分混匀(混合时可能会有浑浊，但混匀后就会消失)。BCA 工作液室温24 小时内稳定。2. 稀释标准品：取100 微升BSA 标准品用PBS 稀释至1ml（样品一般可用PBS 稀释），使终浓度为0.5mg/ml。3. 取八支（或者更多）5ml 离心管，标上号，按下表加入试剂。离心管号 1 2 3 4 5 6 7（样品管1） 8（样品管2） 9（样品管3）标准蛋白BSA0 40ul 80ul 120ul 160ul 200ul 200ul 适当稀释的样品1200ul 适当稀释的样品2……PBS 200ul 160ul 120ul 80ul 40ul 0 0 0 0BCA 工作液2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml4. 37℃放置15-30 分钟。用分光光度计测562nm 处吸光值，根据标准曲线计算出蛋白浓度。注意事项：1. 长期不用时，Cu 试剂与PBS 稀释液可置于2-8℃保存，如发现细菌污染则应丢弃。BCA 试剂在低温条件下出现结晶沉淀时，可37℃温育使其完全溶解, 不影响使用。2. 样品中若含有较多干扰物质时，请采用Bradford 蛋白浓度测定试剂盒。3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。相关产品：PC0001 BSA 标准品（5mg/ml）PC0021 BCA 试剂PC0030 Lowry 法蛋白浓度测定试剂盒PC0010 Bradford 法蛋白浓度测定试剂盒R0010 高效RIPA 组织/细胞快速裂解液R0050 核蛋白抽提试剂盒P1300 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒T1070 5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液PR1600 预染低分子量蛋白MarkerP1015 4×蛋白上样缓冲液（含DTT）D1060 10×电泳转移缓冲液PE0010 ECL Plus 荧光检测试剂(ECL 超敏发光液)SolarbioBeijing Solarbio Science & Technology Co., LtdTel: 010-56371210Fax: 010-56371281/82Http://www.solarbio.cn