原理:
SILAC (Stable isotope labeling using amino acids in cell culture)是一种新型强大的在复杂的蛋白质样品中鉴定和定量分析不同处理样品的蛋白质表达差异的方法。其主要原理是,将同位素如13C标记的“重”赖氨酸或或12C标记的“轻”赖氨酸,或者是将15N标记的精氨酸掺入到缺失这些氨基酸的细胞培养基中,在具体的实验中将待研究(或处理组)细胞和对照分别培养在这两种特制的缺少赖氨酸或精氨酸的缺陷型培养基中,在培养过程中通过分别添加相应的13C标记的“重” 氨基酸或12C标记的“轻” 氨基酸来获得补偿,通过这种在不同标记的培养基中培养,对照组的蛋白质就会标记上12C标记的“轻”氨基酸,而处理组的蛋白质就会标记上3C标记的“重”氨基酸,然后联合采用质谱技术,即可快速全面的鉴定,定量比较蛋白质的表达差异。
该试剂盒适用于能在DMEM或者RPMI1640培养基生长的细胞,并且提供了用于标记的同位素氨基酸,培养基和透析型胎牛血清。同时可提供重链13C615N4 L-精氨酸(Product # 89990)以提高同位素标记的覆盖率,如果与Pierce的蛋白质/多肽样品富集kit联合使用,可以极大的提高低丰度蛋白质,细胞表面蛋白,细胞器特异性蛋白,糖基化以及***酸化等翻译后修饰的检测。
应用:
- 定量分析不同处理细胞的蛋白表达丰度变化。
- 对没有相应抗体的蛋白进行准确定量。
- 对正常细胞和疾病细胞的蛋白表达谱进行比较分析。
- 一次性高通量进行大量蛋白质的鉴定和定量分析。
特点:
- 高效性:100%的标记率。
- 重现性:有效消除由不同的样品处理引起的实验差异性。
- 灵活:有两种非***性同位素标记氨基酸可供选择,可最大限度地覆盖不同序列组成的蛋白质。
- 相容性:蛋白表达可在各种各样的细胞系里表达如HeLa, 293T, COS7, U2OS,A549, A431, HepG2, NIH 3T3, Jurkat 以及其它细胞系。
实验流程:
产品信息:
目录号 | | 规格 | 价格 RMB | 备注 |
89982 | Pierce SILAC Protein Quantitation Kit-RPMI1640 组成: SILAC RPMI Media Dialyzed FBS 13C6 L-Lysine-2HCl L-Lysine-2HCl L-Arginine-HCl | Kit 2 x 500 ml 2 x 50 ml 50 mg 50 mg 2 x 50 mg | 6093 | |
89983 | Pierce SILAC Protein Quantitation Kit-DMEM 组成: SILAC DMEM Media Dialyzed FBS 13C6 L-Lysine-2HCl L-Lysine-2HCl L-Arginine-HCl | Kit 2 x 500 ml 2 x 50 ml 50 mg 50 mg 2 x 50 mg | 6093 |
相关产品信息:
目录号 | 产品名称 | 规格 | 价格 RMB | 备注 |
89984 | SILAC RPMI Media (RPMI-1640 Medium minus L-Lysine and L-Arginine) | 500 ml | 479 | |
89985 | SILAC DMEM Media (DMEM Medium minus L-Lysine and L-Arginine) | 500 ml | 479 |
89987 | L-Lysine-2HCl | 50mg | 299 |
89988 | 13C6 L-Lysine-2HCl | 50mg | 3711 |
89989 | L-Arginine-HCl | 50mg | 299 |
89990 | 13C615N4 L-Arginine-HCl | 50mg | 3711 |