| BCA微量蛋白浓度测定试剂盒说明书 |
| 型号:null 产品货号： PC0050 |
| 价格:请致电：010-57128832,18610462672 |
| 品牌: 北京/中国 |
BCA微量蛋白浓度测定试剂盒说明书 货号：PC0050 规格：500微孔(500T)/1000微孔(1000T)/2000微孔（2000T） 保质期：本试剂盒自订购之日起一年内有效。 产品内容： 包装 500微孔 1000微孔 2000微孔 保存 BCA试剂 100ml 2×100ml 4×100ml 室温 Cu试剂 3ml 6ml 12ml 室温 PBS稀释液 30ml 60ml 120ml 室温 BSA蛋白标准 (5mg/ml BSA) 0.3ml 0.5ml 1ml -20℃ 产品简介： 碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+， Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS，Triton X-100，Tween不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA，EGTA)、还原剂（DTT，***）和脂类的影响。实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高，可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。 操作说明： 一 . 微孔酶标仪法 1. 配制工作液: 根据标准品和样品数量，按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂（50:1）配制成BCA工作液，充分混匀(混合时可能会有浑浊，但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。 2. 稀释标准品：先用PBS将BSA标准品稀释至终浓度为0.8mg/ml备用。再依次稀释至80、40、20、10、5、2.5ug/ml.。 3. 高浓度蛋白可将样品作适当稀释（最好多做几个梯度，如作2倍、4倍、8倍稀释），由于移液器在取小量时的误差，标准线前面的点可能不很准确，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。 4. 各孔加入200微升BCA工作液和40ul稀释后的蛋白或标准品溶液，对照孔加入PBS稀释液。37℃放置4小时。用酶标仪测定A562nm，根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时，应注意防止因水分蒸发影响检测结果。二 . 分光光度计法如没有酶标仪，在离心管中混匀样品后加入比色皿，用分光光度计比色。 采用分光光度计测定蛋白浓度方法与酶标仪法相似，只需要按照分光光度计比色皿容量要求按照比例配置相应的BCA工作液和标准品溶液。 常规比色皿用量为200ul有样本加入1mlBCA工作液或400ul样本加入2mlBCA工作液。微量比色皿 用量为20样本加入100ul BCA工作液。或根据仪器情况自行调整。 附：样本及标准品稀释示意图 样本管号 A B C D E PBS稀释液用量 180 100 100 100 …… 标准品用量 20（原液） 100（从A管吸出） 100（从B管吸出） 100（从C管吸出） …… 终浓度（ug/ml） 80 40 20 10 …… 注意事项： 1. 长期不用时，Cu试剂与PBS稀释液可置于2-8℃保存，如发现细菌污染则应丢弃。BCA试剂在低温条件下出现结晶沉淀时，可37℃温育使其完全溶解, 不影响使用。 2. 样品中若含有较多干扰物质时，请采用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 相关产品： PC0001 BSA标准品（5mg/ml） PC0015 5×G250(蛋白定量用) PC0021 BCA试剂 PC0030 Lowry法蛋白浓度测定试剂盒 PC0010 Bradford法蛋白浓度测定试剂盒 R0010 高效RIPA组织/细胞快速裂解液 PR1600 预染低分子量蛋白MARKER R0050 核蛋白抽提试剂盒 P1015 4×蛋白上样缓冲液（含DTT） P1300 SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 D1060 10×电泳转移缓冲液 PE0010 ECL Plus荧光检测试剂(ECL超敏发光液) Solarbio Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd Tel: 010-56371210 Fax: 010-56371281/82 Http://www.solarbio.cn |