mRNA磁性分离试剂盒
英文名称： Magnetic Mrna Isolation Kit
型号:null    产品货号： S1550S
价格:请致电：010-57128832,18610462672
品牌: usa

 NEB的mRNA磁性分离试剂盒可用于从细胞或组织中分离完整的poly(A)+ RNA，此过程不需要酚和其它有机溶剂。该技术的原理是将Oligod(T)25与1 μm顺磁性磁珠偶合后，以此为液相支持物直接结合poly(A)+ RNA。利用此方法可以进行多个样本的分离，也适用于自动化通高量分离。此外，磁性分离技术可得到较小体积的完整RNA洗脱液，不需要再从洗脱液中沉淀poly(A)+转录物，因此，在1小时内就能分离得到体现原始样品中mRNA分布特性的完整poly(A)+ RNA。Oligod(T)25磁珠可再生3次，实验者可选择将分离到的mRNA洗脱下来或直接以结合于mRNA上的dTDNA为引物来进行cDNA第一链合成。

概述

NEB的mRNA磁性分离试剂盒可用于从细胞或组织中分离完整的poly(A)+ RNA，此过程不需要酚和其它有机溶剂。该技术的原理是将Oligod(T)25与1 μm顺磁性磁珠偶合后，以此为液相支持物直接结合poly(A)+ RNA。利用此方法可以进行多个样本的分离，也适用于自动化通高量分离。此外，磁性分离技术可得到较小体积的完整RNA洗脱液，不需要再从洗脱液中沉淀poly(A)+转录物，因此，在1小时内就能分离得到体现原始样品中mRNA分布特性的完整poly(A)+ RNA。Oligod(T)25磁珠可再生3次，实验者可选择将分离到的mRNA洗脱下来或直接以结合于mRNA上的dTDNA为引物来进行cDNA第一链合成。


 
试剂盒成分

♦ Oligo d(T)25磁珠

♦ 裂解/结合缓冲液

♦ 冲洗缓冲液I, II, III

♦ 洗脱缓冲液


 
 

通过以下poly(A)+提取实验验证了提取的RNA一致性和分离结合的一致性，并具有较宽分离范围：首先将递减的HEPG2细胞(从5 x 105到1 x 10 3)，直接在微量滴定板上进行裂解/结合，然后加入磁珠分离mRNA。使用ProtoScript M-MuLv第一链cDNA合成试剂盒(NEB #E6300)，以oligo(dT)为引物将mRNA的十分之一，反转录成cDNA。并使用特异引物qPCR肽基脯氨酰异构酶来检测这个低丰度的管家基因。


 
参考文献

(1) Wu, N. et al. (2004) Mol. Biotech., 27, 119–125.

(2) Daldoul, S. et al. (2008) Anal. Biochem., 372, 148–155.