在许多生物学研究中钙离子的测定非常重要。在与钙离子结合的条件下，荧光探针显现出光谱响应，这使研究者可以通过利用荧光显微镜、流式细胞仪、荧光分光镜和荧光分光仪等来研究细胞内部游离的Ca2+浓度的变化。在众多易受UV（紫外光）激发的钙离子指示剂中，Fura-2和Indo-1是最常使用的。当Indo-1 按比率发射时，Fura-2能按比例激发。Fura-2在按比例成像显微检测法中使用，在这里改变激发波长与改变发射光波长更有实用性。在与Ca2+结合的条件下，通过扫描300~400nm 的激发光谱发现Fura-2光吸收发生改变，当时监测到发射光在510 nm处。相对地，Indo-1在流式细胞术中作为染料使用，在这里用单一的激光器激发更有实际意义（通常使用光谱线位移在351?64 nm的氩离子激光器）。Indo-1的发射光从无游离Ca2+环境下的480nm转移到400 nm处（当与Ca2+）。Indo-1 AM是Indo-1的一种具有细胞渗透性的形式。
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