英文名称： RNA病毒基因组提取试剂盒
RNA病毒基因组提取试剂盒
产品简介：
本试剂盒适合于从血清、细胞上清、淋巴液中提取 RNA病毒基因组，不适合于细胞等组织内 RNA病毒基因组的提取。使用本试剂盒提取的基因组 RNA可用于 RT-PCR 实验。
操作步骤：
使用前请先在漂洗液中加入一瓶新开启的无水乙醇，加入到离瓶口约 0.5-1cm 距离，盖好摇匀。所有离心步骤均在 2-8℃条件下进行。
1、 取病毒上清液 0.5ml，12000rpm离心 5min，尽量吸尽上清使用，弃去沉淀（如无沉淀可省去此步）。
2、 向病毒上清中加入 20ul 10mg/ml 的蛋白酶 K，充分混匀，65℃消化 10min，期间可颠倒离心管混匀数次。
3、 吸附柱前处理：从包装中取出吸附柱，放入收集管中，加入 700ul 洗柱液，室温放置 2分钟， 2-8℃ 12000rpm离心 2min，弃废液，将吸附柱放入收集管中待用。
4、 向病毒上清中加入 500ul结合液，充分混匀。再向管中加入 400ul 无水乙醇，充分混匀，此时可能会出现絮状沉淀，不影响 RNA 的提取，可将溶液和絮状沉淀都加入吸附柱中，静置 2min。（吸附柱的最大容积为 750ul，可分两次加入。一次吸附完离心后再将余下的混合液体加入柱中静置离心。）
5、12000rpm离心 2min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。
6、 向吸附柱中加入 700ul 漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心 1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。
7、 向吸附柱中加入 500ul 漂洗液，12000rpm离心 1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。
8、 12000rpm 离心 2min，将吸附柱置于室温或 50℃温箱放置数分钟，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR等。
10、将吸附柱放入一个干净的离心管中，向吸附膜中央悬空滴加 50ul-100ul 经 65℃水浴预热的 RNase free
ddH2O，室温放置 5min，12000rpm离心 2min。即可得到高质量的病毒基因组 RNA。
注意事项：
1、经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌，可能导致 RNase 污染。使用无 RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的 RNA提取量也下降。
3、若结合液中有沉淀，可在 37℃水浴中重新溶解。
4、如果样品消化不彻底，后面的离心步骤中可能会出现堵柱子的情况，可适当延长离心时间。
5、洗脱缓冲液的体积最好不少于 50ul，体积过小会影响回收效率。
6、RNA产物应保存在-70℃，以防 RNA降解。
7、RNA 检测：得到的基因组 RNA 片段的大小与病毒的保存条件和种类等因素有关。由于病毒不含有核糖体RNA，所以常规电泳无法检测，只有后期实验才可检测到。 D260值为1相当于大约40 μg/ml单链RNA。
本实验相关试剂：
| R1600 | DEPC处理水 |
| SR0060 | 液相RNase清除剂 |
| SR0040 | 固相RNase清除剂 |
| P1011 | 酚：氯仿：异戊醇＝25：24：1（PH<5.0） |
| P1023 | 酚：氯仿＝25：24（PH<5.0） |
| R1050 | 5×RNALoadingBuffer |
| SR0080 | RNAsaverRNA长效保存液 |
| SR0020 | RNAwait(非冻型组织RNA保存液) |
| M1010 | 10×MOPS缓冲液 |
| SY1040 | SYBRGreen‖(10000×) |
| R1100 | TriQuick总RNA提取试剂 |
| R1200 | 总RNA提取试剂盒 |
以下为索莱宝实验室自产相关试剂盒。
| D1500 | 植物基因组DNA提取试剂盒 | 50T/100T | 400/700 |
| D1600 | 细菌基因组DNA提取试剂盒 | 50T/100T | 400/700 |
| D1700 | 动物组织/细胞基因组DNA提取试剂盒 | 50T/100T | 400/700 |
| D1800 | 全血基因组DNA提取试剂盒 | 50T/100T | 400/700 |
| D1850 | 全血基因组DNA提取试剂系统 | 50T/200T | 360/960 |
| D1900 | 酵母基因组DNA提取试剂盒 | 50T/100T | 400/700 |
| D2100 | 通用基因组DNA提取试剂盒 | 50T/100T | 400/700 |
| D2300 | 真菌基因组DNA提取试剂盒 | 50T/100T | 500/850 |
| D2400 | DNA病毒基因组提取试剂盒 | 50T/100T | 400/700 |
| D2600 | 土壤基因组DNA提取试剂盒 | 50T/100T | 680/1200 |
| D2700 | 粪便基因组DNA提取试剂盒 | 50T/100T | 400/700 |
| R2000 | RNA病毒基因组提取试剂盒 | 50T/100T | 700/1180 |