DNA凝胶回收试剂盒
Gel Purification Kit
(目录号：HS0201)
产品包装
  
   
试剂盒成分
      
50 preps
      
100 preps
     
  
   
Buffer PN
      
40 ml
      
80 ml
     
  
   
Buffer PI
      
20 ml
      
40 ml
     
  
   
Buffer PH
      
4 ml
      
8 ml
     
  
   
Buffer PW
      
50 ml
      
100 ml
     
  
   
Buffer EB
      
10 ml
      
10 ml
     
  
   
Spin Columns CA
      
50个
      
100个
     
  
   
Collection Tubes (2 ml)
      
50个
      
100个
     
   
价格
      
200	元
      
360 元
     
 
保存条件
室温（15 ~ 25℃）
产品简介
本试剂盒用于从琼脂糖凝胶中回收DNA片段。含有目的片段的凝胶溶于Buffer PN中，通过离心吸附柱Spin Columns CA时DNA片段可特异地结合到吸附柱的硅胶膜上，通过漂洗液Buffer PW的清洗可去除杂质，在低盐、高pH条件下洗脱，最后得到纯度较高的DNA片段。
该试剂盒操作简便，质量稳定，得率高，得到的DNA片段可用于酶切、连接、测序、PCR模板等后续的实验。
产品特点
1. 快速：步骤少，操作简便，整个操作仅需十几分钟。
2. 简便：离心吸附柱Spin Columns CA不需要预平衡，漂洗液Buffer PW不用另加酒精，即开即用。
3. 高效：每个离心吸附柱可吸附10 ug以上的DNA片段，回收效率在80%以上。
4. 稳定：正确保存条件下一年内提取效果不发生变化。
注意事项
1. 本试剂盒在室温（15 ~ 25℃）、干燥条件下可稳定保存12个月，更长时间的保存可置于2 ~ 8℃。如溶液产生沉淀，使用前应先将试剂盒内的溶液在室温中放置一段时间，必要时可在37℃水浴溶解，用后及时将瓶盖盖紧。
2. 所有操作都应在室温进行，操作过程中应注意防护，不要将溶液溅到皮肤上，眼睛里。
3. 如下一步实验要求较高，则应尽量使用TAE电泳缓冲液，电泳时最好使用新的电泳缓冲液，以免影响电泳和回收效果。
4. 切胶时，紫外照射时间应尽量短，以免对DNA造成损伤。
5. 回收<100 bp及>10 kb的DNA片段时，应加大溶胶液的体积，延长吸附和洗脱的时间。
6. 回收率与初始DNA量和洗脱体积有关，初始量越少、洗脱体积越少，回收率越低。
操作步骤
1. 切胶。用干净刀片将目的DNA条带切下，尽量切除不含DNA的凝胶。
（注意：紫外线对DNA片段有损坏作用，切胶要迅速，避免长时间照射，同时做好眼睛及皮肤的防护）
2. 称重。将切下的含有目的DNA条带的凝胶切成小块，放入1.5 ml塑料离心管中，称重。
（注意：先称一个空的1.5 ml塑料离心管的重量，然后放入凝胶块再称一次，两次重量相减得到凝胶的重量）
3. 溶胶。加入3倍体积溶胶/结合液Buffer PN，50 ~ 60℃水浴10 min，每隔2 ~ 3 min上下振荡，直到凝胶完全溶解。
（注意：如凝胶重量为100 mg，其体积可视为100 ul，则加入300 ul溶胶液；如凝胶浓度大于2%，所用溶胶液体积加倍；凝胶块最大不能超过400 mg，如超过400 mg，请用多个离心管进行回收。）
4. 缓慢加入1/2倍Buffer PN体积的Buffer PI和1/10倍Buffer PN体积的Buffer PH，混匀。
5. 吸附。待溶液冷却后加入离心吸附柱中，室温静置2 min，让DNA片段与吸附柱Spin Columns CA中的硅胶膜充分结合，然后12,000 rpm离心1 min，弃收集管中废液。
（注意：如总体积超过750 ul可分2次将溶液加入同一离心吸附柱中；为增加目的DNA片段的洗脱浓度，也可将多管溶胶液加入到同一离心吸附柱中）
6. 漂洗。加入500 ul的漂洗液Buffer PW，12,000 rpm离心1 min，弃收集管中废液。
（注意：漂洗液Buffer PW中有酒精，用后应立即盖紧瓶盖，以防酒精挥发)
7. 重复步骤5一次。
（注意：小于500 bp或浓度较低的样品不重复此步骤。一般样品不进行此步骤纯度完全满足下游酶切、连接等实验的要求）
8. 干燥。将离心吸附柱于12,000 rpm离心2 min，甩干残留漂洗液。
（注意：此步不能省略，否则残留乙醇会影响后续实验）
9. 回收。将离心吸附柱置于一个新的1.5 ml塑料离心管中，在吸附柱中央加入30 ~ 50 ul洗脱液，室温放置2 min。12,000 rpm离心1 min收集DNA片段。
（注意：为增加回收效率，可将洗脱液在50 ~ 60℃预热，也可将得到的溶液重新加入到离心管中，室温放置2 min，再次离心收集。如需使用去离子水洗脱，可用NaOH调整其pH值在7.0 ~ 8.5之间）

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联系人：张道军，
电话：18010069130