M-MLV 逆转录酶 ,Rnase H-,点突变 M-MLV逆转录酶是一种依赖于RNA和DNA的DNA聚合酶。它可以单链RNA、DNA或RNA-DNA杂合链为模板，以RNA或DNA为引物启动DNA合成。 该酶带有针对RNA-DNA杂合链中RNA的RNase H活性。 本产品来源于带有编码莫洛尼氏鼠白血病病毒（M-MLV）逆转录酶的pol基因片段的E.coli菌株。   特点： · 产量更高，第一链cDNA可达9kb； · 37℃时活性最高； · 可用于掺入修饰过的核苷酸(e.g. Cy3-, Cy5-, rhodamine-, aminoallyl-,fluorescein-labeled nucleotides)标准第一链cDNA的合成   使用者需要事先准备：  · dNTP Mix (10mM)            · Nuclease-Free Water            · Primer            · RNA Templete   1.  一个常规的反应需要1ng - 5μg total RNA或1ng - 1μg mRNA， ①RNA变性 按照如下配比将各组分加入到已除酶的微量离心管中： Oligo(dT)12-18 (10pmol) or 25pmol random primers or 10 pmole gene-specific primer (GSP)      1 μl dNTP (10mM)                                  2 μl Nuclease-Free Water                           11-x μl RNA (1μg/μl)                                   x μl 65度5min，降温到4度   ②上述变性后退火反应液14ul中加入以下： M-MLV Revertase 5X Reaction Buffer               4 μl RNase inhibitor (Rnasin)                          1 μl M-MLV Revertase                               1 μl Total                                     20 μl 2.  混匀各组分并短暂温和离心；   3.  （此步使用随机引物时必选）30℃ 温浴10min；   4.  接着42℃ 温浴30-60min；   5.  95℃ 温浴5min终止反应；（长片段77度15min）   6.  4℃ 放置5min。 建议：每50 μl PCR反应容积中，加入2-4 μl 第一链cDNA作为模板。   注意 1.       PCR产物>1kb的扩增反应要求去除与cDNA互补的RNA，加入1 μl  (2 units) RNase H，37℃ 温浴20min。 2.       逆转录时添加1M betaine (终浓度) 或 5% DMSO (终浓度)可以增强高GC含量RNA模板的效率。     应用 · 第一链cDNA合成 · RT-PCR和实时RT-PCR · 用于克隆和表达的cDNA合成 · 被标记的cDNA探针检测基因芯片 · DNA标记 · RNA分析中的引物延伸 活力单位定义 一个单位活力定义为，42℃，以poly(A)-oligo(dT)25作为模板-引物，10min内催化1 nmol脱氧核苷酸[3H]dTTP渗入到酸沉淀物中所需酶量。 质量控制 l  经SDS-PAGE电泳分析，纯度达到95%以上； l  无DNA内切酶、3’和5’端DNA外切酶及RNA酶的活性。 l  标准反应体系中由RNA ladder（分子量范围从1.2kb到7.5kb）合成cDNA，能够得到单一的全长1.2kb的产物和部分全长7.5kb的产物。   组    分 M10511 (10000U) M10512 (50000U) M-MLV Revertase 50μl         (200U/μl) 250μl      (200U/μl) M-MLV Revertase 5× Reaction Buffer 200μl 1ml 价    格 360 1440     相关产品 M-MLV Revertase, Rnase H-, Point mutant 10000U M-MLV Revertase, Rnase H-, Point mutant 50000U AMV Reverse Transcriptase 200U AMV Reverse Transcriptase 1000U M-MLV First-Strand cDNA synthesis Kit 20 reactions M-MLV First-Strand cDNA synthesis Kit 100 reactions AMV First-Strand cDNA synthesis Kit 20 reactions AMV First-Strand cDNA synthesis Kit 100 reactions Tow-Step M-MLV RT-PCR System 20 reactions Tow-Step M-MLV RT-PCR System 100 reactions Tow-Step AMV RT-PCR System 20 reactions Tow-Step AMV RT-PCR System 100 reactions One-Step M-MLV RT-PCR System 20 reactions One-Step M-MLV RT-PCR System 100 reactions One-Step AMV RT-PCR System 20 reactions One-Step AMV RT-PCR System 100 reactions