产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 保存 | 价格 |
RTGreen nucleic acid gel stain, 20× concentrate in water | 10207ES76 | 500μl | 2-8℃ | 145.00 |
产品描述
RTGreenTM是一种与SYBR Green I具有相似光谱特性的DNA结合染料,独特的工作特性使其不仅可用于荧光定量PCR(qPCR),而且可用于高分辨率溶解曲线(HRM)分析。相比较于SYBR Green I,优势主要表现在以下三个方面:
1) RTGreenTM对PCR 抑制性远小于SYBR Green I
智能化的“按要求释放”DNA 结合技术赋予RTGreenTM对PCR的低抑制性。正因如此,PCR实验中可使用高浓度的RTGreenTM从而获得大大增强的扩增信号。高浓度的RTGreenTM消除了“染料重分布”的缺陷,使其既可用于多重PCR,也可用于HRM分析。
2) RTGreenTM的稳定性极强
在正常的储存、操作和PCR过程中不会被破坏。在缓冲溶液中的染料可以安全的储存在室温或冰箱里,也可以反复冻融。然而SYBR Green I很不稳定而且降解后对PCR 抑制性更强。
3) RTGreenTM降低细胞膜通透性,操作更加安全
细胞膜穿透性测试表明,RTGreen 几乎不能穿透细胞膜,安全性高。RTGreen 既没有诱变性也没有细胞毒性。相反,虽然 SYBR Green I 本身诱变性很弱,但它在细胞中可能抑制了正常DNA 的修复机制,使其有诱变增强作用。
另外,RTGreenTM具有优越的兼容性,能够和各知名品牌的qPCR仪器兼容。用RTGreenTM替代SYBR Green I,无需改变任何您目前使用的操作步骤和仪器设备,非常方便。
操作步骤(亦可使用实验室常用的SYBR Green I qPCR操作流程)
1. 配制qPCR反应体系(50 μl),如下:
10×polymerase buffer without magnesium | 5 μL |
50mM MgCl2a | 2.5μL |
2 mM dNTP | 5 μL |
20× RTGreenTM | 2.5 μL |
Taq DNA polymeraseb | 1-5 U |
each of primers (final concentrations) | 0.1-1 μM |
ddH2O | Up to 50 μL |
a. 表示使用RTGreenTM染料进行qPCR反应的Mg2+最佳推荐浓度是2.5 mM;
b. 表示使用Hotstart Taq DNA polymerase可以得到更理想的扩增效果,但需要根据经验调整工作体系。
2. 热循环荧光检测仪内进行PCR扩增,并在退火或延伸步骤实时记录荧光信号。
运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。4 ºC干燥避光保存。保质期12个月。