上海远慕生物科技提供完整的人山梨醇脱氢酶（SDH）ELISA定量检测试剂盒操作使用说明书，价格，品牌，操作步骤，注意事项等资讯，本司专业经营不同ELISA试剂盒品牌的进口/国产ELISA试剂盒，提供免费代测服务，所经营的ELISA试剂盒种属涵盖了大鼠，小鼠，人，豚鼠，羊，猴，牛，鸡，兔，狗，猪，鱼及其他动物，若有需要，欢迎订购！

    中文名：人山梨醇脱氢酶（SDH）ELISA试剂盒

    别名：人山梨醇脱氢酶（SDH）ELISA Kit

    货号：YM-4421

    供应商：上海远慕

    规格：48T/96T

    保存温度：2-8℃低温保存

    规 格：48T，96T

    保 质 期：6个月

    用途：科研实验，不作临床

    产品特点：敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存，操作简便。

    产品用途：用于测定血清，血浆及相关液体样本中相关含量或活性。

    检测种属：大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭ELISA试剂盒等种属。

    常见ELISA试剂盒：白介素、选择素、集落刺激因子、肿瘤坏死因子、干扰素、转化生长因子、趋化因子、细胞因子受体、粘附分子、生长因子、凋亡因子等等。

    ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。

    引起ELISA测定错误结果的原因主要有：

    ①标本因素；

    ②试剂因素；

    ③操作因素。

    人山梨醇脱氢酶（SDH）ELISA试剂盒

    人山梨醇脱氢酶（SDH）ELISA定量检测试剂盒液体类标本：

    包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

    1）血清：

    室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

    2）血浆：

    应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

    3）尿液：

    用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

    4）细胞培养上清：

    检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/ 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

    5）组织标本：

    切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

    人山梨醇脱氢酶（SDH）ELISA定量检测试剂盒注意事项：

    1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

    2.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

    3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

    4.请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

    5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

    6.底物请避光保存。

    7.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

    8.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

    9.本试剂不同批号组分不得混用。

    10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

    人山梨醇脱氢酶（SDH）ELISA试剂盒标本的采集及保存：

    1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃ 后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

    2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

    3. 细胞培养物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

    注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
    人山梨醇脱氢酶（SDH）ELISA试剂盒操作步骤：

    1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10 孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl 分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 弃掉，再各取50μl 分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl 分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl 弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为120 U/L ，80 U/L，40 U/L，20 U/L，10 U/L）。

    2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

    3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。

    4. 配液：将30（48T 的20 倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T 的20 倍）倍稀释后备用。

    5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。

    6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

    7. 温育：操作同3。

    8. 洗涤：操作同5。

    9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色

    15 分钟。

    10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

    11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止

    液后15 分钟以内进行。

    人山梨醇脱氢酶（SDH）ELISA定量检测试剂盒

    计算：

    以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，

    在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD

    值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释

    倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标

    准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值

    代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释

    倍数，即为样品的实际浓度。

    试剂盒性能：

    1.样品线性回归与预期浓度相关系数R 值为0.990 以上。

    2.批内与批见应分别小于9%和11%。

    人山梨醇脱氢酶（SDH）ELISA Kit基本原理：

    ①抗原或抗体能吸附到固相载体表面，并保持其免疫学活性；

    ②抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，仍保持其免疫学和酶学活性；

    ③酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例，因此，可以按底物显色的程度显示试验结果。