DAPI

　　CAS#：28718-90-3

　　中文名：4’,6-联脒-2-***基吲哚二盐酸盐

　　英文名：4’,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride

　　结构式：

　　分子式：C16H17Cl2N5

　　分子量：350.25

　　性质：

　　1. 外观：黄色粉末

　　2. 纯度：≥95% (HPLC)

　　3. 产品描述：

　　DAPI是一种可对DNA 染色的细胞核染色试剂，它在嵌入双链DNA后释放蓝色荧光。DAPI常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。尽管DAPI不能通过活细胞膜，但却能穿透扰乱的细胞膜而对核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用来检测酵母线粒体DNA，叶绿体DNA，病毒DNA，microplasm DNA以及染色体DNA。DAPI-DNA复合物的激发和发射波长分别为360nm和460nm。

　　4. 染色过程

　　(1) 用1mL ddH2O将DAPI溶解，制得2.9mM的DAPI溶液(1mg DAPI/1mL H2O)。

　　注：DAPI不能直接用PBS等缓冲溶液溶解，需要先用水将其溶解。

　　(2) 取适量DAPI水溶液加到PBS中，制备成10～50µM的DAPI溶液。

　　推荐以下PBS的配制方法：

　　将8.0g NaCl、0.2g KCl、2.9g Na2HPO4·12H2O、0.2g KH2PO4 溶解于1L纯水中。

　　(3) 将1/10培养基体积的DAPI溶液加入到细胞培养基中。也可以用1/10浓度的DAPI缓冲液代替培养基。

　　(4) 在37℃培养细胞10～20分钟。

　　(5) 用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。

　　(6) 用带有360nm激发波长，460nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。

　　储存条件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。

　　注意事项：

　　DAPI对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

　　荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。

　　为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

 

 

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